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血管平滑肌细胞（VSMC）迁移、增生和细胞外基质（ECM）在内膜过度沉积形成新生内膜是支架内再狭窄的主要原因。与PTCA相比，冠脉内支架的应用再狭率窄已明显降低，但支架内再狭窄（in-stent restenosis，ISR）仍然是一个严重的问题。目前全身用药都未能减少ISR发生率。近距离放射治疗是预防ISR的有效方法，但最大缺点是内皮化延迟和晚期血栓形成。药物包被支架（drug-coated stent）因具有靶血管局部治疗的优点而备受关注。 大蒜作为一种中草药已经应用了数千年，三硫二丙烯（diallyl trisulfide，DT）是大蒜的有效成分之一，具有很强的抗炎、抗血小板聚集、抑制血栓形成、预防动脉粥样硬化等多方面药理作用。体外研究结果显示DT能明显抑制兔主动脉VSMC的增殖；我们实验室已先后成功进行了放射性核素32P胶体和DT包被支架的动物实验，证明血浆蛋白涂膜可良好携带32P和DT，抗血流冲刷能力强，能有效预防支架术后内膜增生。 本实验应用血浆蛋白作为载体，制作DT、32P包被支架以及二者联合包被支架，分别植入犬冠状动脉，进一步研究DT预防支架术后再狭窄的剂量效应关系；研究DT与32P联合支架预防再狭窄的疗效；探讨DT抑制再狭窄的可能作用机制。 实验内容包括三部分。 第一部分，观察DT包被支架对犬冠状动脉损伤后内膜增生的量效关系。制作蛋白包被的DT包被支架，剂量分别为0μg（对照组）、60μg（小剂量组）、130μg（中剂量组）和210μg（大剂量组）。在犬左冠状动脉分别置入过大的单纯蛋白包被支架和DT包被支架，于术后28天和6个月冠状动脉造影后处死动物，取出带支架血管组织分为三份，一份固定在2.5％戊二醛中，用于制作扫描电镜标本，观察内皮覆盖情况；一份塑料包埋，碳化钨钢刀切片，分别行elastic-van Gieson和Masson染色，形态学观察，另一份用于第三部分分子生物学指标检测。结果发现，术后28天，对照组血管内膜表面已完全内皮化，210μg DT包被支架组＞90％内皮化；光镜结果显示，各组血管损伤程度无显著性差异（P＞0.05）。内弹力板层包绕面积在各组间无差别。支架置入后28天，对照组内膜明显增厚，ECM面积占内膜总面积的40％，6个月后增加到91％（P＜0.001）。DT呈剂量依赖性减少内膜ECM比例。血管参数分析显示，各指标在小剂量组与对照组差异均无显著性（P＞0.05）；术后28天，大、中剂量组的平均新生内膜厚度、新生内膜面积无差别（P>0.05），但均大于小剂量组和对照组（P<0.OOI）;DT呈浓度依赖性增加管腔面积（P<0.OI）和抑制面积狭窄率（P<0.001）。术后6个月，所有指标大、中剂量组与小剂量组、对照组之间均有统计学差别;DT呈浓度依赖性抑制内膜增生（P<0.01）;管腔面积、新生内膜面积及面积狭窄率在大、中剂量组间无差别（P>0.05）。上述结果表明，60林gDT对预防再狭窄无效，在支架置入术后6个月内，中、高剂量DT（130陀，210林g）包被支架呈剂量依赖性地抑制支架术后内膜增生，其机制与DT降低内膜SMC聚集和减少ECM沉积有关。 第二部分，设计DT与32P联合包被支架，置入犬无病变的冠状动脉，期望经两个不同途径，更彻底地抑制内膜增生。分别制作蛋白涂层的DT包被支架（210林留支架），’ZP包被支架（20林ei/支架）和DT与犯P联合包被支架（210林g+20林ei/支架）置入犬冠状动脉，于术后28天和6个月行冠状动脉造影后处死动物，取材，分别制作扫描电镜标本和组织切片，行elastic一van Gieson和Masson染色，形态学观察，进行参数测量、计算。结果发现，术后6个月，DT包被支架组血管内膜表面完全内皮化，联合包被支架组内皮化程度与32P支架组相似（80%）。Masson染色显示，各治疗组抑制内膜增生的同时伴有ECM含量的降低，联合组最低。血管参数分析发现，术后28天和6个月，各指标在治疗组与对照组差异均有显著性意义（尸<0.05）;联合包被组的平均新生内膜厚度、新生内膜面积和面积狭窄率均小于32P和DT组（尸<0.05），但管腔面积大于32P和nT组（尸<0.05）;各指标在32P和DT两组间无差别（P>.05）。术后28天，联合包被组的平均新生内膜厚度虽小于32P组（尸<0.05），但与DT组无差别（P>.05）;6个月后不仅联合包被组对内膜增生的抑制程度大于32P和DT组（尸<0.05），而且DT组对内膜增生的抑制程度大于32P组（尸<0.05）。6个月后冠状动脉造影结果显示，邻近参考血管直径在各组间差异无显著性。其余指标在治疗组与对照组差异均有显著性意义（P<0.05）。支架段血管直径狭窄程度，联合包被组小于犯P组和DT组（尸<0.05）。支架边缘段血管直径狭窄程度，DT组和对照组无差别，但32P组和联合组直径狭窄程度均大于对照组（p至0.016）。冠造结果未发现动脉瘤及局部血栓形成。上述结果表明，DT和犯P联合包被支架抑制内膜增生程度大于单纯犯P和DT包被支架，但内皮化程度没有进一步减少，提示联合包被支架预防ISR疗效更显著，但不增加副作用。联合包被支架的应用为开发即能有效预防内膜增生，又能快速内皮化的药物提供了新的思路。 第三部分，观察DT包被支架对基质金属蛋白酶一9，一2（MMP一9，一2）和金属蛋白酶组织抑制剂一1，一2（TIMP一1，一2）基因表达的影响，并探讨血管?