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磺胺类药物(sulfonamides，SAs)是一类化学合成抗菌药，广泛用于食品动物，其在动物性食品中的残留超标比其他任何兽药残留都严重，故对人类健康造成了威胁。本研究旨在通过制备针对SAs的簇特异性多克隆抗体、单克隆抗体，初步建立SAs多残留的ELISA快速筛选方法，为SAs多残留快速检测试剂盒的研制打下基础。
首先模拟磺胺类药物母核氨苯磺胺的结构合成了两种半抗原S1、S2，采用薄层层析色谱(TLC)监控反应进程。并通过气相色谱-质谱法和液相色谱-质谱法对半抗原进行了结构鉴定。采用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法(NHS)和混合酸酐法(MA)合成了三种人工免疫原S1-BSA(NHS法)、S1-BSA(MA法)、S2-BSA(NHS法)以及三种包被原S1-OVA(NHS法)、S1-OVA(MA法)、S2-HSA(NHS法)。最终交联结合物进行紫外扫描，结果表明，结合抗原最大吸收峰发生了漂移，介于小分子半抗原和载体蛋白之间，表明交联成功。
用合成的三种免疫原免疫6只新西兰白兔，间接ELISA和间接竞争ELISA监测免疫效果。经5次免疫后，效价稳定，三组免疫原的最高血清效价均达到1∶300000。选择抑制效果较好的第1、3组多抗血清建立ELISA检测方法，绘制竞争标准曲线，并进行混药添加测定。ELISA实验结果表明：第1组多克隆抗体，对6种常用磺胺药SMD、SMM、SMZ、SDM、SDM、SD的IC10分别为0.010、0.046、0.010、0.10、0.067、0.019μg/mL，低于最高残留限量0.10μg/mL，而SM2、SQ、磺胺氯哒嗪、磺胺氯吡嗪的IC10较高为0.21、0.23、0.23、0.22μg/mL；第3组多克隆抗体，对SMD、SMM、SMZ、SDM、SQ、SD、磺胺氯哒嗪、磺胺氯吡嗪的IC10分别为0.0091、0.051、0.058、0.088、0.020、0.010、0.014、0.011μg/mL，低于最高残留限量，而SM2、SDM的IC10为0.12、0.20μg/mL。并对两组多克隆抗体分别进行混合药液添加回收率试验，回收率为54.5％～111.8％和54.2％～130.3％，变异系数在3.6％～10.9％和3.7％～5.9％。
用合成的三组免疫原免疫BALB/c小鼠。第1、2组效价较高，经4次免疫后达到1∶100000以上，第3组最高效价达到1∶32000。选择对混合药液有抑制的1、3组小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合制备单克隆抗体。第1组小鼠未筛选到阳性杂交瘤细胞。第3组小鼠融合后，筛选到一株稳定分泌抗SAs簇特异性抗体的细胞株2C11，有限稀释法进行克隆，建株2C11-C2-B6。
对纯化后的单克隆抗体进行交叉反应试验。其中9种磺胺药SMD、SMZ、SD、SDM、SMM、SQ、SM2、磺胺氯哒嗪、磺胺氯吡嗪的IC10低于SAs最高残留限量，分别为＜0.01、0.065、4.91、5.37、11.4、72.9、99.3、＜0.01、6.70ng/mL；SDM的IC10=7.63×102ng/mL对磺胺药的交叉反应性较高，常用抗生素以及结构类似物不影响对磺胺类药物的测定，抗体对磺胺类药物有较好的簇特异性。