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目的动脉粥样硬化(Atherosclerosis, AS)是比较常见的一种心血管疾病,是引起多种心脑血管疾病的病理生理基础和主要原因,如冠心病、脑卒中等,从而严重威胁人类的生命健康和生活质量。本课题拟从动物模型和细胞模型两个层面,研究AS痰瘀互结证的生物学基础,并采用自组祛痰化瘀方药进行干预,观察其对AS痰瘀互结证的调节机制,为临床治疗各种与痰瘀互结相关疾病提供借鉴。方法1.复制高脂血症／动脉粥样硬化动物模型。2.采用祛痰化瘀方干预,检测高脂血症/动脉粥样硬化模型小鼠血脂水平、外周血单核细胞比例及表面TLR4、血浆细胞因子水平(LPS刺激3h后)、主动脉细胞因子水平,评价祛痰化瘀方对高脂血症/动脉粥样硬化小鼠的干预作用。3.复制代表动脉粥样硬化发生过程中三种不同分化阶段的单核-巨噬细胞模型：单核细胞、巨噬细胞、泡沫细胞。4.采用祛痰化瘀方含药血清干预,鉴定三种细胞表型和功能,评价祛痰化瘀方对单核细胞向巨噬细胞分化、成熟巨噬细胞进一步分型以及巨噬细胞向泡沫细胞分化的影响。结果1.祛痰化瘀方可以显著升高ApoE-/-小鼠外周血抗炎(定居型)单核细胞比例,同时降低炎性单核细胞比例。2.祛痰化瘀方抑制LPS刺激3h后ApoE-/-小鼠血浆炎性细胞因子水平,如TNF-α、 IFN-γ、IL-12、IL-6、MCP-1。3.祛痰化瘀方抑制ApoE-/-小鼠血管炎性细胞因子的基因表达,如IL-6、IL-1β、MCP-1、 TNF-α;同时促进血管抗炎细胞因子基因表达,如TGF-β、IL-10、Arg-1。4.祛痰化瘀方含药血清促进单核细胞向M2型巨噬细胞分化。含药血清干预后,巨噬细胞表面M2型特异性受体CD206、M2型基因Argl的表达显著增加,M1型基因NOS2的表达显著降低。5.祛痰化瘀方含药血清促进已分化成熟的巨噬细胞向M2型转化。含药血清干预后,CD206和Arg1的表达显著增加,M1型基因NOS2的表达显著降低。结论体内动物实验研究发现,祛痰化瘀方可以降低ApoE-/-小鼠外周血炎性单核细胞比例,降低炎性细胞因子水平,同时,升高抗炎单核细胞比例,抑制全身炎性反应；升高主动脉血管抗炎细胞因子水平,抑制炎性因子水平,从而抑制动脉局部的免疫反应,纠正AS模型小鼠的免疫紊乱,达到抑制AS发生发展的作用。体外细胞模型发现,祛痰化瘀方含药血清可以促进单核细胞向M2型巨噬细胞分化,促进成熟巨噬细胞向M2型转化,从而减缓、抑制高脂血症引发的动脉粥样硬化的发生发展。