厚荚相思树种根瘤菌的多样性研究

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从厚荚相思(Acacia crassicarpa)树种上分离、纯化获得45个菌株,其中组培苗、实生苗、扦插苗的厚荚相思根瘤菌各15株。对该45株根瘤菌进行了苗木回接、生理生化特性、生长适应性实验,并进行了16S r DNAPCR-RFLP分析以及16S r DNA全序列分析,对所获菌株进行了初步的归类及多样性分析。   全部菌株接种到厚荚相思苗木上都能结瘤,平均结瘤数为9.6个。单株结瘤数最高的为Qx6-8,结瘤数为结瘤率为100%。最差的是ZX3-2,单株结瘤数2.5个,结瘤率为50%。   供试的45株菌株均不能把乳糖还原为3.酮基乳糖,59%的菌株能利用柠檬酸盐,36%的菌株能水解利用淀粉,91%的菌株能液化明胶。在石蕊牛奶的反应中,有36%的菌株产酸,64%的菌株产碱。11%的菌株能利用铵盐,84%的菌株能利用硝酸盐。所有菌株都能较好地利用供试的8种碳源。   供试菌株的最适生长温度为30℃,不耐高温与低温,只有QX6-8能在9℃下生长良好。最适生长环境为近中性,具有较强的耐碱性,耐酸能力较差。Qx6-8、Qx8-3能耐受2.O%的NaC1浓度。对抗生素敏感性差异较大,大部分菌株对Amp、Tc、Cm、Spc、Gm有较强的抗性作用,而对Km无抗性。QX6-8具备多种优良抗性。   对45株菌株进行了16S rDNA PCR-RFLP分析,根据其16S rDNA的酶切图谱类型供试菌株初步分成11类。说明厚荚相思根瘤菌存在丰富的多样性。   对39株菌株进行16S rDNA全序列分析,初步确定39株供试菌株可分为5类。ZZ2-2、ZZl-5、SZ5-4、Q9-8为芽孢杆菌属(Bacillus)。SX5-4、QZ2-2为中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium)。QS5-4为寡养单孢菌属(Stenotrophomonas)。QX6-8为伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia)。ZS3-4、ZS2-2、ZS4-3等31个菌株属于慢生根瘤菌属Bradyrhizobium)。   扦插苗根瘤菌的抗逆性要比组培苗和实生苗根瘤菌的抗逆性强,但是根瘤菌的分类跟苗木发育类型并无特定联系。
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