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油菜蜂花粉(Rape Bee Pollen)是蜜蜂从油菜花药中采集的花粉经加入腺体分泌物而形成的团粒物,具有抗衰老、提高免疫力、抗前列腺增生和抗肿瘤等诸多生理活性,在食品、医疗保健等领域有着广泛的应用。油菜蜂花粉具有很好的抗良性前列腺增生(Benign Prostatic Hyperplasia, BPH)活性,但目前活性物质基础和作用机理尚不明确。本文以油菜蜂花粉为原料,研究其抗BPH活性的物质基础。(1)油菜蜂花粉各萃取物抗BPH活性研究。90%乙醇提取油菜蜂花粉,依次利用不同有机溶剂萃取,得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和萃余物四个部分,利用雄激素诱导BPH模型小鼠研究高(400mg/kg·d)、中(200mg/kg·d)、低(100mg/kg·d)剂量各萃取物的抗BPH活性。结果显示,高、中、低剂量乙酸乙酯萃取物和高剂量石油醚萃取物均能显著降低模型小鼠前列腺指数、血清二氢睾酮(DHT)、睾酮(T)、雌二醇(E2)的含量和前列腺酸性磷酸酶(PAP)的活力(P <0.05or P <0.01);高、中剂量乙酸乙酯萃取物和高剂量石油醚萃取物均能显著降低模型小鼠前列腺组织湿重(P <0.05)。说明乙酸乙酯萃取物和石油醚萃取物具有抗BPH作用。(2)油菜蜂花粉各粗分组分抗BPH活性研究。利用MCI色谱柱对石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物的合并组分进行粗分离,得到粗分组分PI、PII、PIII。经雄激素诱导BPH模型小鼠检测高(200mg/kg·d)、中(100mg/kg·d)、低(50mg/kg·d)剂量各粗分组分的抗BPH活性。结果显示,高、中、低剂量粗分组分PII和高、中剂量粗分组分PIII均可显著降低模型小鼠前列腺指数、血清DHT、T、E2含量和PAP的活力(P <0.05or P <0.01),高、中剂量粗分组分PII和高剂量粗分组分PIII可显著降低模型小鼠前列腺湿重(P <0.05)。表明粗分组分PII、PIII具有显著的抗BPH活性。(3)油菜蜂花粉各粗分组分的分离鉴定。利用MCI、ODS等色谱柱进行分离,从PI部分中得到化合物1,PII部分中得到化合物2、3、4,PIII部分分离出化合物5、6。利用NMR方法鉴定出物质结构:化合物1为山奈酚-3-O-β-D吡喃葡萄糖苷,化合物2为十八碳-9Z,12Z,15Z-三烯酸甘油酯,化合物3为3’-甲氧基-1’-十八碳-9Z,12Z,15Z-三烯酸甘油酯,化合物4为十八碳-9Z,12Z,15Z-三烯酰基-N-乙基甘油醚,化合物5为2’-甲氧基-1’,3’-十八碳-9Z,12Z,15Z-三烯酸甘油二酯,化合物6为α-亚麻酸。(4)油菜蜂花粉各单体化合物抗BPH活性研究。将高(100mg/kg·d)、低(50mg/kg·d)剂量单体化合物1、2、3、4、5、6和[(50+50) mg/kg·d]剂量混合物(2+3)分别灌胃雄激素诱导BPH模型小鼠,研究其抗BPH活性。结果,高、低剂量化合物3,高剂量化合物2及混合物(2+3)均可显著降低模型小鼠前列腺湿重、指数血清DHT、T、E2含量和PAP的活力(P <0.05or P <0.01)。因此,化合物2、3和混合物(2+3)都有效抑制制小鼠BPH,由统计结果可发现化合物2和化合物3存在明显的协同作用。