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目的：研究端粒酶逆转录酶（Telomerase reverse transcriptase，TERT）是否参与丙烯酰胺（Acrylamide，ACR）诱导的大鼠脑皮层神经元的损伤作用及其可能的作用机制。方法：1.动物实验分组：将16只雄性SD大鼠随机分为：正常组，ACR低剂量组，ACR中剂量组，ACR高剂量组。其中正常组注射生理盐水，ACR低、中、高剂量组分别隔天腹腔注射注射等体积不同浓度的ACR，其剂量分别为30mg/kg，40mg/kg，50mg/kg。连续一个月，观察各组中大鼠的体重变化及活动情况。2.ACR对大鼠脑神经元凋亡的影响：腹腔注射ACR连续一个月后，将大鼠处死。每组选择一半大鼠用多聚甲醛固定，取脑组织做切片，用TUNEL免疫荧光检测大脑脑损伤情况及皮层神经元凋亡情况；另一半大鼠提取脑组织匀浆，用Western blot检测脑组织中凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3、Bcl-2的表达以及对TERT表达的影响。3. ACR对大鼠脑皮层神经细胞凋亡作用的影响：提取SD大鼠乳鼠的大脑皮层神经元细胞，将细胞分为四组，正常组，ACR低剂量组，ACR中剂量组，ACR高剂量组。其中正常组加入PBS溶液，低、中、高浓度组分别用2.5mM/L，5mM/L，10mM/L浓度的ACR干预细胞24hACR处理后的细胞，采用MTT法以及流式细胞术（FCM）测定细胞存活率以及细胞凋亡率。用Western blot检测细胞中凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3，Bcl-2的表达。4.ACR对大鼠脑皮层神经细胞中TERT表达的影响：分别提取细胞总蛋白，胞浆蛋白以及线粒体，用Western blot及Real-time PCR检测细胞水平中TERT的蛋白水平以及mRNA水平表达。7.ACR对大鼠脑神经元皮层细胞（reactive oxygen species，ROS），超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD），丙二醛（malondialdehyde，MDA），谷胱甘肽过氧化酶（glutathione peroxidase，GSH-PX）活性以及谷胱甘肽（glutathione，GSH）含量的影响：用ACR含量分别为2.5mM/L，5mM/L，10mM/L的浓度干预神经细胞24h，提取皮层神经细胞中的线粒体，检测线粒体中SOD和GSH-PX的活性以及GSH和MDA含量，用流式细胞术检测细胞中ROS的表达。结果：1.SD大鼠隔天腹腔ACR注射一次，连续一个月后，正常组的大鼠体重在一个月内持续稳定的增长，而ACR组的增长速度小于正常组，体重从第二周起变化显著，并以高剂量组的变化最为明显。ACR组大鼠后肢明显无力，嗜睡。Tunel免疫荧光的结果显示，正常组脑皮层区域中出现少量凋亡细胞；而与正常组相比，ACR（低剂量、中剂量、高剂量）组中Tunel阳性细胞数逐渐增加，其中以高剂量组增加最为显著；Western blot结果显示大鼠脑组织中Cleaved Caspase-3表达随着ACR剂量的增加而增加，而Bcl-2以及TERT的表达却随着ACR剂量的增加而表达降低。2..在体外试验中，ACR干预神经元皮层细胞24小时后，MTT法检测细胞存活率发现ACR（2.5mM/L，5mM/L，10mM/L）组与正常组相比，其细胞存活率显著降低；FCM检测结果显示：与正常组比较，ACR组（2.5mM/L，5mM/L，10mM/L）细胞凋亡率明显增加（P<0.05），且呈剂量依赖性。细胞中CleavedCaspase-3表达随着ACR浓度增加而增加，而Bcl-2的表达却随着ACR浓度的增加而表达降低。Western blot及Real-time PCR结果均显示细胞中ACR低中剂量组TERT表达上升，ACR高剂量组的TERT的表达下降，而胞浆蛋白中TERT的表达却无显著变化。3.ROS，SOD，GSH-PX活性及GSH和MDA含量的检测结果显示：与正常组比， ACR处理组线粒体中SOD、GSH-PX活性及GSH含量随着ACR浓度增高明显降低，而MDA含量则明显升高（P <0.05），且呈剂量依赖性。ROS也随着ACR含量增加而表达升高。结论：1.在整体动物水平， ACR能促进大鼠脑神经细胞凋亡，上调CleavedCaspase-3的表达而下调Bcl-2的表达，说明ACR的神经毒性作用可能是通过caspase途径以及线粒体的调控触发凋亡的。2.ACR能上调细胞中ROS的含量，降低线粒体中SOD, GSH-PX活性及GSH含量，增加MDA含量，说明ACR能降低细胞抗氧化的能力，通过产生氧自由基诱导氧化应激的损伤。3.在整体动物水平上，ACR下调TERT的表达；在细胞水平上，ACR低中剂量诱导TERT的表达，高剂量降低TERT的表达，但胞浆中TERT的表达无显著变化，说明ACR对TERT的影响作用可能主要存在于线粒体中，并且.线粒体TERT可能是以一种代偿机制反应参与ACR介导的神经元细胞凋亡。