嗜麦芽窄食单胞菌噬菌体TS-10的分离鉴定及对细菌生物膜作用的研究

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嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)是引起院内感染的条件致病菌之一,可寄居在人的呼吸道和肠道中,易在住院患者的结膜、皮肤、以及口腔呼吸道等部位定植。嗜麦芽窄食单胞菌具有极其复杂的耐药机制,它的外膜通透性也很低,对多种抗生素都不易渗透,现如今面对嗜麦芽窄食单胞菌的治疗日渐困难,噬菌体疗法日益被接受,作为一种自然和绿色的抗菌手段重回人们的视野。本研究以嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株为宿主菌,从湖水中分离出了一株裂解性噬菌体TS-10,噬菌体TS-10属于有尾噬菌体目、肌尾噬菌体科,呈蝌蚪状外形,头部为正二十面体结构,直径约为110nm,有一条螺旋对称的可收缩的尾;噬菌体TS-10具有很强的宿主特异性;噬菌体TS-10的最佳感染复数为0.01,潜伏期为15min,裂解期为65min。噬菌体TS-10对温度较为敏感,70℃时噬菌体TS-10在30min时丧失全部活力,80℃时在20min时失活。噬菌体TS-10在p H 4-11的条件下仍保持着较高的滴度,在p H12的条件下,噬菌体的活性略有下降,在p H3的条件下,噬菌体的活性大幅下降。对噬菌体TS-10进行了全基因组测序并已上传至Genbank,其序列号为OK018136。噬菌体TS-10的基因组全长为42931 bp,GC含量为59.92%,基因组中含有53个ORFs,其中预测为已知功能的ORF有18个,未知功能的ORF有35个,将其划分为结构蛋白模块、包装蛋白模块、复制/重组蛋白模块、代谢模块和裂解模块五个部分;经检测后尚未检测出毒力基因和耐药基因。进化分析显示,其属于窄食单胞菌类噬菌体,与已报道的窄食单胞菌噬菌体BUCT598的进化关系最近。噬菌体TS-10对生物膜的影响,从形态观察、OD值的测定、活菌计数三个指标进行探究,发现噬菌体TS-10既能抑制嗜麦芽窄食单胞菌生物膜的形成,也能对已经形成的嗜麦芽窄食单胞菌生物膜有裂解作用。综上,噬菌体TS-10在医疗方面存在很大潜力,未来在应用于噬菌体疗法和噬菌体制剂的开发上有很大的可能性。
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