【摘 要】
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该课题对霍乱弧菌铁调节蛋白基因irgA启动子在霍乱弧菌菌苗候选株IEM101中的铁调控表达特性,及其用于诱导表达可分泌性霍乱毒素B亚单位(CTB)进行了研究.为避免利用报告基因la
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该课题对霍乱弧菌铁调节蛋白基因irgA启动子在霍乱弧菌菌苗候选株IEM101中的铁调控表达特性,及其用于诱导表达可分泌性霍乱毒素B亚单位(CTB)进行了研究.为避免利用报告基因lacZ系统以质粒形式检测irgA启动子效率时染色体上相关基因的影响,该课题分别缺失了IEM101染色体上irgA启动子及lacZ基因的部分片段,获得了双基因缺失株IEM101ΔZA.将irgA启动子及其转录必需序列克隆在pUC18质粒上,并在其下游插入含信号肽序列的ctxB结构基因,构建了融合表达质粒pCTBA.该研究结果表明,irgA启动子在IEM101ΔZA中有明显的铁调控性,低铁条件下可高效表达并分泌CTB.irgA启动子可用于高效表达外源保护性抗原成分以构建多价菌苗或进行发酵获取外源蛋白质.
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