贡嘎蝙蝠蛾粉拟青霉(Paecilomyces farinosus)遗传多样性的SCoT和ISSR标记研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wri666
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
贡嘎蝙蝠蛾(Hepialus gonggaensis)是形成冬虫夏草的虫体之一,在其繁育过程中易被粉拟青霉(Paecilomyces farinosus)侵染而罹患拟青霉病。为研究病原菌的遗传多样性,分别采用L12(4’x33)混合水平正交实验设计优化SCoT-PCR和ISSR-PCR的反应体系并筛选出最佳反应循环次数、引物及相应退火温度,在此基础上利用SCoT和ISSR两种分子标记方法研究了80株粉拟青霉的基因组DNA并进行聚类分析和两种标记方法的比较。试验结果如下:1.粉拟青霉菌遗传多样性的SCoT分析优化后的粉拟青霉SCoT-PCR反应体系为:20 μL体系中,DNA 45ng、引物0.7μmol/L、MIX混合液7μL、Taq酶1U,反应体系的最适循环次数为40次。应用此反应体系从15个SCoT通用引物中选出条带多态性高且清晰的10条引物,分别是S12、S13、S14、S15、S19、S28、S29、S31、S32、S34。分别以80株粉拟青霉DNA为模板,采用上述PCR反应条件进行SCoT-PCR。10条SCoT引物共获得104个扩增位点,其中多态性位点69个,多态性比率为66.35%。对SCoT-PCR的结果进行聚类分析得出:80株粉拟青霉菌种内有着丰富的遗传多态性,遗传相似系数在0.66-0.95之间,且在0.751处可分为六大类。2.粉拟青霉菌遗传多样性的ISSR分析优化后的ISSR-PCR反应体系为:20gL体系中,DNA 60ng、引物0.6μmol/L、MIX混合液6μL、Taq酶0.8U,反应体系的最适循环次数为40次。应用此反应体系从15个1SSR通用引物中选出条带清晰且多态性高的10条引物,分别是701、702、703、807、808、809、810、835、855、873。分别以80株粉拟青霉DNA为模板,采用上述PCR反应条件进行ISSR-PCR。10条ISSR引物共获得96个扩增位点,其中多态性位点56个,多态性百分率为58.33%。对ISSR-PCR结果进行聚类分析得出:80株菌的遗传相似系数在0.70-0.96之间,在0.756处可分为五大类。3.粉拟青霉遗传多样性的SCoT和ISSR比较分析SCoT扩增的平均条带数、多态性位点数和多态性百分率均略高于ISSR标记,说明SCoT标记能检测出更多的多态性遗传位点,略优于ISSR分子标记。ISSR标记的遗传相似系数的范围及其平均值,以及将供试菌株分类处的遗传相似系数均大于SCoT标记,说明SCoT标记方法比ISSR标记方法具有更高的辨识度。根据SCoT和ISSR两种标记方法得出来的两个聚类结果可以得出以下结论:分离自楼房外南面木头的65号菌单独分成一大类是因其遗传距离最远;同一地方地理来源的菌株没有全部分到同一类群中,正如分离自楼房南面外墙的12号和26号菌以及分离自楼房北面外墙的20和61号菌分别被分到不同的两大类群中;分离自二楼实验室8、9、10、11、14号房以及中央大厅的菌株都被分在不同类群中。来源于同一虫体或虫态的菌株大部分是分在不同类群中,但也有少数菌株分在同一类。例如分离自贡嘎蛹上的16号和46号菌分别被分到不同的两大类群中,以及分离自3-4龄贡嘎幼虫身上的37和62号菌分别被分到不同的两大类群中。分离自5-6龄贡嘎幼虫身上的48号和78号菌都归属于同一类群;分离自西藏林芝幼虫身上的1号菌、6-8龄贡嘎幼虫身上的14号菌和贡嘎蛹上的16号菌都分在了第1(1)亚类中。试验结果中分离自人工繁育基地不同环境或虫态的蝙蝠蛾粉拟青霉与采集分离自地理远缘的西藏林芝、青海拉脊雪山、甘肃玛曲、四川小金不同虫态蝙蝠蛾的粉拟青霉可以聚在相同或不同类群中,充分明了四川康定折多山冬虫夏草人工繁育基地的粉拟青霉具有丰富的遗传多样性。
其他文献
<正>基因食品的基本概念基因食品作为一个新的概念,得到大家的广泛关注。科学意义上的转基因,主要是为了提升某些植物或者是动物的品质,将基因进行科学的嫁接,这样可以综合各
本报讯(记者 颜新文 通讯员 丁谨之)“从2015年12月正式启动,截至今年4月底,全省开展基层作风巡察共发现问题14693个,党纪政纪处分2537人,移送司法机关338人,月均发现问题800多个…
报纸
<正>10月17日,南开大学迎来建校百年!百年南开,芳华灼灼,硕果累累,而精华之最,当属"巍巍我南开精神"(校歌词)。南开精神是南开价值取向的升华、办学理念的沉淀、人格气质的内
自从中国共产党第十八次全国代表大会召开以来,在山东省委、省政府的统一部署下,以完善市场监督管理体制的改革在全省范围内拉开了序幕。本文的研究目的,就是以青岛市城阳区
继黑格尔之后,1984年美国艺术哲学家阿瑟&#183;丹托再次提出“艺术终结论”而声名鹊起,他将艺术终结之后的“后历史时期”的艺术状态界定为“美学熵状态”。丹托所描述的当代
<正>国外总发行:中国国际图书贸易总公司(地址:北京399号信箱邮编:100044国外发行代号:M3684)《地质通报》是中华人民共和国自然资源部主管、中国地质调查局主办的地质学综合
“自由”是翻译研究中一个最基本的溉念,也是中西方翻译史上最容易引起争议的话题之一。本文试图从不同意义观观照下的“自由”概念,翻译过程中“自由”的空间与限度以及“自由
对于直线过定点问题,可以通过两种常用策略来解答。解答时合理运用设而不求、整体思想和消元思想,可以在一定程度上简化运算过程,提高解题效率。
随着经济的迅速发展,电源结构的不断改善, 大容量高参数的装机比例日益提高,与此同时对于电力的辅助设备电除尘器的要求也相应的提高。随着这个趋势,电除尘器不仅在技术上要