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糖酵解途径中的酶具有代谢功能之外的众多生物学活性。不少研究报道显示,病原菌的三磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphata dehydrogenase,GAPDH)具有毒力相关作用和疫苗应用的潜力。本实验室的前期工作也发现鱼类重要病原菌迟缓爱德华氏菌的二磷酸果糖醛缩酶(Fructose-1,6-bisphosphate aldolases,FBA)具有免疫保护作用。本研究进一步探索了迟缓爱德华氏菌糖酵解途径中另外8个酶包括:己糖激酶(Hexokinase,HK)、磷酸葡萄糖异构酶(Phosphoglucose isomerase,PGI)、磷酸果糖激酶(Phosphofructokinase,PFK)、磷酸丙糖异构酶(Triose phosphate isomerase,TPI)、磷酸甘油酸激酶(Phosphoglycerate kinase,PGK)、磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglycerate mutase,PGM)、烯醇化酶(Enolase,ENO)、丙酮酸激酶(Pyruvate kinase,PK)是否也具有免疫保护效果。首先从本实验室所分离的强毒株迟缓爱德华氏菌EIB202中克隆出上述8种酶的编码基因,并在大肠杆菌中重组表达并纯化获得了重组蛋白。进而将纯化的8种重组蛋白分别免疫模式生物斑马鱼,用强毒株EIB202攻毒考察这些重组蛋白的相对免疫保护力,结果显示重组蛋白PGK、ENO和PGM的相对免疫保护力较高,达到50%左右。随后,利用重组蛋白PGK、ENO和PGM免疫大菱鲆考察其在临床鱼种中免疫保护效力,发现免疫大菱鲆的血清中含有较高的抗体效价,并能与其它海洋病原菌发生交叉反应,提示这3种蛋白是广谱型疫苗开发的优选靶标。最后,利用荧光实时定量PCR分析蛋白免疫斑马鱼后免疫相关因子的表达变化,发现这3种重组蛋白均能通过Myd88依赖途径激活鱼体的适应性免疫应答并刺激机体产生IgM。本研究的结果显示糖酵解途径中的PGK、ENO和PGM也是良好的抗原蛋白,可用于广谱型疫苗的开发。