结膜下应用Fasudil凝胶在家兔高眼压模型中的应用

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目的:通过复方卡波姆溶液前房注射建立家兔高眼压模型,研究Fasudil在青光眼中的作用。方法:选取21只清洁级家兔,根据随机数字表将家兔分为7组,A组原凝胶组;B组纳米银组;C组氧化石墨烯组;D组纳米银+氧化石墨烯组;E组纳米银+氧化石墨烯+乙酰唑胺组;F组纳米银+氧化石墨烯+Fasudil组;G组为高眼压对照组。所有家兔右眼为实验干预眼,左眼为正常对照眼,Goldman非接触眼压计干预前3天连续测量得到的眼压作为基线眼压。分别于实验干预前1天,及干预后第3天予家兔右眼上方球结膜下放置各组药物,复方卡波姆溶液造模成功后,每天早上9:00及晚上9:00分别测眼压一次,如有任意一组家兔右眼压低于22mmHg,则各组家兔统一重复前房注射等量的复方卡波姆溶液。干预后第0、6天于各组进行眼前节OCT检查。造模后第7天按规定处死各组家兔,取眼球组织做冰冻切片,进行免疫荧光染色检查α-SMA蛋白的表达。结果:造模成功率约为88.89%,在第5-6天达到峰值眼压。其中纳米银+氧化石墨烯+Fasudil组、纳米银+氧化石墨烯+乙酰唑胺组眼压升高程度及峰值均小于其他各组,差异比较有统计学意义(P<0.05),A组、B组、C组、D组及其G组间差异不具有统计学意义(P>0.05),眼压结果提示复方卡波姆溶液是诱导动物高眼压模型较为理想的材料,Fasudil具有降眼压作用。前节OCT图像中,在第6天时,前节OCT图像中,各组家兔角膜厚度增加,出现角膜水肿,其中纳米银+氧化石墨烯+Fasudil组角膜厚度增加最少,水肿程度最低,纳米银+氧化石墨烯+乙酰唑胺组其次,差异具有统计学意义(P<0.05),各组家兔角膜的改变符合高眼压状态角膜水肿的病理改变。第7天时,家兔结膜创口基本愈合,免疫荧光染色显示各干预组α-SMA阳性表达,正常对照组无表达,提示结膜纤维化增加,创口瘢痕愈合,E组α-SMA阳性率明显低于其他各组,差异具有统计学意义(P<0.05),α-SMA免疫荧光结果提示Fasudil具有抑制成纤维细胞增殖,抗瘢痕作用,同时结膜下给药的方式是一种安全有效的给药方式。结论:复方卡波姆溶液是一类诱导动物高眼压模型的较理想的材料;法舒地尔具有降眼压和抗瘢痕作用;结膜给药的方式是一种具有潜力的给药方式。
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