结肠癌、恶性脑胶质瘤、非小细胞肺癌肿瘤微环境的研究

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肿瘤微环境指的是肿瘤局部浸润的间质细胞,免疫细胞和它们所分泌的活性介质与肿瘤细胞共同组成的局部的内环境。肿瘤特殊的微环境导致肿瘤有其独特的特征,如抵抗细胞死亡,细胞能力异常,基因组不稳定和持续增殖的信号,回避生长抑制,免疫逃逸,无限的复制能力,特异的血管生成,浸润和转移等。这些特征导致肿瘤的传统治疗方法如手术切除,放疗和化疗效果不理想,病人预后较差,易复发和转移。肿瘤细胞能促进血管的新生,有着入侵和转移的能力,这些肿瘤行为受到肿瘤微环境中的非肿瘤细胞的调节。肿瘤内部混乱的血管构造导致很多区域的缺氧坏死,血管对肿瘤药物的吸收和运输存在重要影响,所以目前已有针对肿瘤的微环境如抑制血管新生等治疗手段。而成纤维细胞是肿瘤间质细胞中的一大类,对肿瘤细胞起着至关重要的支撑作用。相对于复杂的肿瘤细胞,有着稳定遗传物质的成纤维细胞显然更容易成为研究肿瘤药物的靶点。所以本研究选取三种不同的肿瘤模型,研究其血管密度和胶原纤维含量的差异。肿瘤在生长过程中,不同的体积也将对药物的运输产生影响。肿瘤体积过大,则往往内部更多的处在缺氧缺血的状态,而这种缺血缺氧导致的酸性,炎症环境,都将会对药物的运输有着重要的影响。人体内肿瘤的倍增时间往往与病人的生存时间,手术预后等有着明显的关系,裸鼠皮下移植瘤的生长速度也各有不同。这些不同的生长速度同样影响着肿瘤的内部形态和组成,所以本研究也将评估三种肿瘤模型中肿瘤的不同体积和生长速度。本研究采用的方法为在裸鼠皮下注射成系肿瘤细胞悬液的方法来构建肿瘤模型。分别用HT29细胞、U87-MG细胞、A549细胞皮下移植瘤模拟结肠癌、脑胶质瘤、非小细胞肺癌这三种肿瘤的微环境。通过将CD31免疫组化染色、胶原纤维MASSON三色染色方法直观的观察肿瘤内部的血管和胶原纤维含量,再通过MVD法和图像处理软件将图片半定量,从而得到较为精确的数据。再将数据进行统计学分析,从而得出结论:这三种肿瘤模型在生长速度、微血管密度、胶原纤维含量上面都有显著差异。为使用这三种肿瘤模型的药物筛选实验提供指导。
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