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橡胶籽在我国广东、海南、云南、广西、福建和台湾等省均有种植,橡胶籽每年大概产量有80~100万t。按以往的习惯,橡胶林只是用来生产橡胶和木材,剩下有利用价值的橡胶籽未得到充分利用,丢弃在橡胶园中,造成有效资源的严重糜掷。橡胶籽仁含粗脂肪50.2±0.4%,粗蛋白21.5±0.6%,粗纤维6.5%±0.5%,碳水化合物18.2%±0.9%;橡胶籽仁还含有维生素,而且铜、铁、锌、锰、硒等微量元素含量高达260 mg/kg,是豆粕的3倍。橡胶籽仁中营养丰富,可作为一种新的植物油脂及蛋白资源加以开发利用。本课题以西双版纳的橡胶籽仁为原料,研究四种方法制备橡胶籽油,并对各自油脂得率、脂肪酸组成、理化性质及感官指标分析进行分析比较;研究超滤膜膜法脱胶橡胶籽毛油及对膜法脱胶前后的一些基本理化指标进行检测和对比。研究了橡胶籽蛋白质的提取最佳工艺,并对橡胶籽蛋白进行纯化,再对橡胶籽蛋白进行凝胶电泳实验、氨基酸组成分析及对橡胶籽蛋白进行扫描电镜观察;参照Osborne分级提取法并进行改进制备橡胶籽四种蛋白质溶液,对橡胶籽四种蛋白溶液进行超滤膜过滤制备四种蛋白并对超滤膜膜法制备的橡胶籽四种蛋白SDS-PAGE凝胶电泳实验的分析,测其超滤之后制备橡胶籽四种蛋白分子量分布并对橡胶籽四种蛋白的微观结构的扫描电镜观察各个蛋白的表面结构及排布。本研究主要得到如下结论:(1)研究了压榨法、浸出法、超声波辅助溶剂法及酶法制备橡胶籽油的油脂得率、脂肪酸组成、理化性质及感官指标分析。橡胶籽含仁率高,且仁中粗脂肪含量及蛋白含量高,占整个仁的70%以上,氰化物1.5×10~2mg/Kg;超声波辅助溶剂法得油率最高且为98.41%;水酶法最低且为68.74%;浸出法制取油的酸值最高(0.58mgKOH/g油),压榨法酸值最低(0.12 mgKOH/g油);在过氧化值方面,压榨法过氧化值最高(0.65 mmol/Kg),水酶法最低(0.46 mmol/Kg),其中氰化物四种方法制备的橡胶籽油均未检测出;橡胶籽油中不饱和脂肪酸在84%左右。(2)研究了对橡胶籽毛油进行超滤膜膜法脱胶。以橡胶籽毛油为原料,在单因素实验的基础上,通过Plackeet-Burman试验对进行单因素筛选再进行Box-Behnken响应面法分析,通过回归模型方差分析结果,得到回归模型,再通过回归模型,得到膜法脱胶的工艺优化后的最佳工艺条件,即膜孔径10 kDa,混合液中油的质量分数37%、操作压力0.23 MPa,此条件下得到的膜法脱胶的磷脂的截留率96.51%、膜通量46.22 Kg/(m~2·h);对脱胶前后的橡胶籽油进行基本指标检测:橡胶籽毛油中磷含量691 mg/kg、过氧化值6.3 mmol/kg、酸值3.32 mgKOH/g、水分及挥发物0.54%、碘值92g/100g,膜法脱胶后的橡胶籽油中磷含量16.54 mg/kg、过氧化值2.7 mmol/kg、酸值1.28 mgKOH/g、水分及挥发物0.24%、碘值108 g/100g,对于膜法脱胶后的橡胶籽油中的磷脂含量远远低于橡胶籽毛油,而且膜法脱胶后的橡胶籽油的过氧化值、酸值、水分及挥发物和碘值都普遍降低,气味较好,颜色较澄清,透明。(3)研究了橡胶籽蛋白的制备工艺方法及特性。提取橡胶籽粗蛋白最佳工艺:液料比15:1、碱溶pH 10.2、碱溶60 min、提取温度50℃、超声功率274 W、酸沉pH为3.8、酸沉120 min,此时的橡胶籽粗蛋白提取率最高为80.62%;纯化橡胶籽蛋白最佳工艺:酶解温度为45℃、酶解pH为4.5、液料比为8:1、酶添加量为0.4%、酶解时间为4.5 h,此时的橡胶籽蛋白质的纯度为94.67%;对橡胶籽蛋白进行氨基酸分析:糖化酶纯化橡胶籽蛋白质氨基酸总和高达84.72%,其中谷氨酸含量最高且高达24.47%,必须氨基酸含量丰富,占总体氨基酸含量的27.14%;对橡胶籽蛋白进行扫描电镜观察:糖化酶处理后的蛋白质呈现出薄片状,表面感觉略有粗糙。(4)研究了橡胶籽四种蛋白的制备及特性。改良Osborne分级提取法及超滤膜法制备橡胶籽蛋白质:清蛋白最佳工艺条件为超滤膜膜孔径50 kDa、超滤时间30min、操作压力0.39 MPa、超滤温度39℃、蛋白液浓度0.69 g/L,此时的截留率97.16%、膜通量17.33 Kg/(m~2·h),球蛋白制备:超滤膜膜孔径50 kDa、超滤时间38min、操作压力0.34 MPa、超滤温度31℃、蛋白液浓度0.72 g/L,此时的截留率为99.09%、膜通量18.01 Kg/(m~2·h);醇溶蛋白:超滤膜膜孔径30 kDa超滤时间31 min、操作压力0.33 MPa、超滤温度32℃、蛋白液浓度0.51 g/L,此时的截留率为97.58%、膜通量18.54 Kg/(m~2·h);谷蛋白:超滤膜膜孔径50 kDa超滤时间28 min、操作压力0.37 MPa、超滤温度38℃、蛋白液浓度0.69 g/L,此时的截留率为97.01%、膜通量26.42Kg/(m~2·h);对橡胶籽四种蛋白SDS-PAGE凝胶电泳实验的分析:清蛋白分布大概在49.8 kDa、41.4 kDa、24.3~16.4 kDa,球蛋白分布大概在49.5 kDa、25.1~24.3 kDa,醇溶蛋白分布大概在26.2 kDa、17.1~12.6 kDa,谷蛋白分布大概在36.4 kDa、24.2kDa、20.4 kDa、16.8~15.3 kDa以及更小的分子量;对橡胶籽四种蛋白的微观结构的扫描电镜观察得知:橡胶籽清蛋白和橡胶籽球蛋白分子之间连接紧密,橡胶籽清蛋白的表面细致,呈山脊形状,局部部位有孔;橡胶籽球蛋白的表面疏松,局部凸起,表面孔相对较少。橡胶籽醇溶蛋白和谷蛋白与清蛋白和球蛋白不同的是,醇溶和谷蛋白的蛋白分子之间连接松散,醇溶蛋白呈现不规则的球型形状,局部部分相对细致,相互连接形成较大的分子基团;谷蛋白的表面平滑,分子团较多。