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目的探讨CD137-CD137L信号是否通过Rab7分子调控自噬影响小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)外泌体的分泌。方法采用组织块贴壁法原代培养小鼠胸主动脉平滑肌细胞,取分离培养的第3-5代VSMC进行实验。实验分为四组:对照组;CD137激动组(CD137L重组蛋白10μg/ml,激动CD137信号);慢病毒对照组(对照干扰慢病毒干预+CD137L重组蛋白);Rab7慢病毒干扰组(Rab7干扰慢病毒干预+CD137L重组蛋白)。采用Western Blot法检测各组VSMC微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ)、p62及Rab7蛋白的表达。荧光显微镜观察自噬双标腺病毒(mRFP-GFP-LC3)感染后自噬流变化。透射电镜观察VSMC来源外泌体的形态及大小,Western Blot法检测CD9、CD81及Hsc70外泌体相关标记物和自噬相关蛋白LC3Ⅱ的表达。NTA(Nanoparticle Tracking Analysis)技术检测各组外泌体浓度及粒径大小。结果(1)在透射电子显微镜下,小鼠VSMC来源的囊泡状结构大小约30-150nm,Western Blot显示囊泡外泌体标记物CD9、CD81的高表达。(2)CD137激动组VSMC中Rab7、LC3Ⅱ和p62蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。Rab7慢病毒干扰组Rab7、LC3Ⅱ和p62蛋白表达低于CD137激动组(P<0.05)。慢病毒对照组与CD137激动组无差异(P>0.05)。(3)各组VSMC自噬流显示:CD137激动组VSMC内荧光斑点总数和黄色荧光点数均多于对照组(P<0.05),且CD137激动组VSMC内黄色荧光点数多于红色。而Rab7慢病毒干扰组VSMC内荧光斑点总数和黄色荧光点数均少于CD137激动组(P<0.05),且Rab7慢病毒干扰组VSMC内红色荧光斑点数多于黄色。慢病毒对照组与CD137激动组无差异(P>0.05)。(4)各组VSMC培养基中外泌体的分泌水平显示:CD137激动组细胞分泌的粒子数明显高于对照组(P<0.05);Rab7慢病毒干扰组细胞分泌的粒子数明显低于CD137激动组(P<0.05)。CD137激动组细胞分泌的外泌体中Hsc70蛋白表达高于对照组(P<0.05);Rab7慢病毒干扰组细胞分泌的外泌体中Hsc70蛋白表达低于CD137激动组(P<0.05)。慢病毒对照组与CD137激动组无差异(P>0.05)。(5)各组VSMC培养基中外泌体的自噬相关蛋白表达:各组外泌体中可以检测到Lc3Ⅱ蛋白的表达,且CD137激动组外泌体Lc3Ⅱ蛋白表达高于对照组(P<0.05),Rab7慢病毒干扰组外泌体LC3Ⅱ蛋白表达低于CD137激动组(P<0.05),慢病毒对照组外泌体LC3Ⅱ蛋白表达与CD137激动组无差异(P>0.05)。结论CD137信号可能通过Rab7调控自噬影响小鼠血管平滑肌细胞外泌体的分泌。