目的:研究肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中SHOX2、RASSF1A甲基化及端粒酶活性检测对肺结节良恶性鉴别诊断的临床意义。方法:1、研究对象:选取从2018年09月-2020年01月之间于苏北人民医院诊断为肺结节且行纤维支气管镜检查患者,有确切病理患者共38例,包括恶性肺结节(肺癌)患者27例,良性肺结节患者11例,将良性肺结节患者作为对照组。2、收集患者的临床资料、实验室检查结果、病理结果等;每位患者均进行纤维支气管镜检查,并收集肺泡灌洗液,肺泡灌洗液离心后取沉淀细胞,分别用于细胞学分析、PCR法检测SHOX2、RASSF1A甲基化,PCR-ELISA法检测端粒酶活性。3、统计学分析:使用SPSS 26统计软件对数据进行分析,卡方检验分析BALF中SHOX2、RASSF1A甲基化、端粒酶活性在良恶性肺结节中的差异,使用ROC曲线分析SHOX2、RASSF1A甲基化、端粒酶活性、细胞学分析、血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)等对恶性肺结节(肺癌)诊断的敏感性、特异性、AUC,p<0.05有统计学意义。结果:1、BALF中SHOX2、RASSF1A甲基化、端粒酶活性在恶性肺结节中阳性率高于良性肺结节,差异有统计学意义(p<0.05)。2、诊断效果:BALF中SHOX2和RASSF1A两基因甲基化联合(敏感性:70.4%,特异性:81.8%,AUC:0.761)诊断效果优于单个基因甲基化。BALF中端粒酶活性诊断敏感性:74.1%,特异性:72.7%,AUC:0.734。BALF中两基因甲基化联合及端粒酶活性诊断效果优于BALF细胞学分析(敏感性:25.9%,特异性:100.0%,AUC:0.630)、血清CEA(敏感性:7.4%,特异性:90.9%,AUC:0.492)。端粒酶活性+细胞学分析(敏感性:77.8%,特异性:72.7%,AUC:0.753)、两基因甲基化联合+细胞学分析(敏感性:77.8%,特异性:81.8%,AUC:0.798)诊断效果明显提高,多个指标联合检测方面以两基因甲基化联合+端粒酶活性+细胞学分析诊断敏感性最高、诊断效果最好(敏感性:92.6%,特异性:72.7%,AUC:0.827)。结论:1、肺泡灌洗液中SHOX2、RASSF1A甲基化、端粒酶活性在恶性肺结节(肺癌)患者中阳性率高于良性肺结节患者,存在显著差异。2、肺泡灌洗液中SHOX2和RASSF1A两基因甲基化联合检测、端粒酶活性检测、细胞学分析三者联合在良恶性肺结节中诊断效果最好,肺泡灌洗液中SHOX2和RASSF1A两基因甲基化联合检测、端粒酶活性检测可能成为肺结节良恶性鉴别诊断的良好指标且为肺泡灌洗液细胞学分析的有效补充手段。