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红霉素是由微生物发酵法产生的大环内酯类抗生素,抗菌谱较广。在红霉素产业链中,硫氰酸红霉素是一种重要的医药中间体。本文采用大孔吸附树脂进行提炼发酵液中的红霉素,结晶得到产品硫氰酸红霉素并进行纯化。
本工艺主要流程是将发酵液采用微滤膜过滤,得到澄清液,采用大孔树脂吸附,然后经过碱性缓冲液洗涤后,使用醋酸丁酯洗脱,洗脱液结晶得到产品硫氰酸红霉素。在发酵液中红霉素B、C含量偏高的情况下,采用丙酮-水溶剂体系进行重结晶纯化。本文主要对大孔树脂吸附分离红霉素工艺的影响因素进行了分析研究,并提出了重结晶纯化工艺。
1.本文首先确定了本工艺的分析方法,比较了化学效价测定方法和高效液相色谱分析方法在收率计算中的差异,发现高效液相色谱能够更准确的反映大孔吸附树脂提炼红霉素工艺。
2.本文研究了大孔树脂吸附提炼红霉素工艺,实验发现大孔吸附树脂能够有效的从发酵液中吸附富集红霉素,发酵液效价在3000~4000u/ml时,1BV的树脂可处理15~20BV的发酵液,醋酸丁酯能够充分洗脱富集在树脂上的红霉素A且用量少仅为2BV,全过程收率在75%以上。
3.经过多次实验发现发酵液质量是本工艺的主要影响因素之一,直接关系到产品质量。若发酵液中红霉素A的相对百分含量高于68%,红霉素B、C的含量低于3%,将洗脱液成盐结晶即可得到合格品。若发酵液中红霉素B、C的含量较高,需进行重结晶以获得高品质产品。本文建立了硫氰酸红霉素在丙酮-水溶剂体系中重结晶工艺,并确定了工艺条件。重结晶后红霉素A的收率达85%,红霉素C含量降低50%~60%。