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S-腺苷蛋氨酸(SAM)是细胞内重要的生理活性物质,具有转甲基、转氨丙基、转硫基等生理功能,能够预防和治疗关节炎、抑郁症、肝病等疾病,在国内外都有很大的市场需求。但是由于菌种问题及技术不成熟,在我国还没有实现工业化生产。本文利用复合诱变和原生质体融合技术选育SAM的酿酒酵母菌株。主要工作如下：1.比较了冻融法、乙醇提取法和高氯酸法对酿酒酵母细胞破碎提取SAM的不同效果,发现东融法和乙醇法对SAM的稳定性有很大影响,容易造成SAM的损失,不利于SAM的提取。高氯酸法细胞破碎效果最好,释放的SAM量最多,选为SAM的提取方法。研究并建立了SAM的分析测定方法,选择精确而高效的HPLC法进行测定,SAM的保留时间在7min左右,每个样品药10min就可测定完毕。2.对13个出发菌株进行了生孢鉴定并测定了它们的生物量和SAM产量,从中选择出SAM产量高的出发菌株R1进行单倍体分离,得到60株单倍体。对其中SAM产量较高的单倍体hR10进行UV和DES复合诱变,在含有10μg/mL制霉菌素的平板上进行筛选,最后获得4株SAM产量有明显改善的菌株DR1-3、NM14、NM39、NM45,与各自的出发菌株相比SAM产量分别提高了34.3%、10.9%、14.1%、18.7%。3.以DR1-3、NM14、NM39、NM45为亲本,通过双亲灭活法进行标记,运用PEG诱导亲本的融合,在含有20μg/mL制霉菌素的双层平板上进行筛选,共得到90个融合子,对它们的生物量及SAM产量进行测定,最后筛选到一株SAM产量有明显提高的融合子F35,其SAM产量为22.5mg/L,与出发菌株R1相比提高了103%；SAM含量为1.97mg/gDCW,是出发菌株R1的近2倍,并且遗传稳定性实验表明其F35的SAM高产性状稳定。4.优化了融合子F35发酵生产SAM的培养基及发酵条件。结果表明,以麦芽糖为碳源、蛋白胨为氮源,pH为6,培养温度在30℃时有利于F35的生长和SAM的发酵生产。最后用正交实验寻求发酵培养基成分及发酵时间的最优组合,确定各因素对SAM发酵产量的影响大小顺序为：蛋白胨>NH4Cl>麦芽糖>发酵时间>NH4H2PO4；优化的培养基配方为麦芽糖10%,蛋白胨1%,NH4H2PO4 0.4%,NH4Cl0.5%,MgS040.01%、KH2PO40.6%；发酵时间为72h。