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白芍为毛茛科植物芍药(Paeonia lactiflora Pall.)的干燥根,主产于浙江、安徽、四川等地。性微寒,味苦酸,具有养血柔肝、缓中止痛、敛阴收汗的功用。本文综合运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、反相MPLC以及制备型HPLC等色谱分离手段,对白芍(Paeonia lactiflora Pall.)60%乙醇提取物中促进小鼠脾淋巴细胞增殖的活性部位(乙酸乙酯萃取部分)的化学成分进行了系统分离,从中分离得到化合物20个。通过理化性质和现代波谱学手段(UV、IR、MS、1H-NMR、13C-NMR和2D-NMR)鉴定了它们的结构,分别为：4’-O-苯甲酰芍药苷(4’-O-benzoylpaeoniflorin) (1)*,4-O-没食子酰白芍苷(4-O-galloylalbiflorin) (2)*,芍药苷(paeoniflorin) (3),乙酰芍药苷(acetylpaeoniflorin) (4),苯甲酰芍药苷(benzoylpaeoniflorin) (5),苯甲酰化芍药苷(benzoyloxypaeoniflorin) (6),4-O-甲基-苯甲酰芍药苷(4-O-methyl-benzoylpaeoniflorin) (7),白芍苷(albiflorin) (8),没食子酰白芍苷(galloylalbiflorin) (9),苯甲酰白芍苷(benzoylalbiflorin)(10),芍药新苷(lactiflorin) (11),1-O-β-D-glucopyranosyl-8-O-benzoylpaeonisuffrone (12), 6’-O-benzoylpaeonidanin (13),柚皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(naringenin-7-O-β-D-glucopyranoside)(14)#,(+)-儿茶素((+)-catechin) (15),苯甲酸(benzoic acid) (16),没食子酸(gallic acid) (17),没食子酸甲酯(methyl gallate) (18),没食子酸乙酯(ethyl gallate) (19),五没食子酰葡萄糖(pentagalloylglucose) (20)。其中包括单萜苷类化合物13个,黄酮类化合物2个,芳香酸及其酯类化合物4个,鞣质类化合物1个。其中化合物1、2为新化合物,化合物14为首次从该属植物中分离得到。采用DAD-HPLC建立了白芍60%乙醇提取物及其促进小鼠脾淋巴细胞增殖活性部位(乙酸乙酯萃取部分)的指纹图谱。通过与分离得到的单体化合物进行对照,对指纹图谱中的主要色谱峰进行了指认。用峰面积以归一化法计算,指认的主要色谱峰的峰面积分别占指纹图谱总峰面积的85.1%和84.3%。采用小鼠脾淋巴细胞增殖的实验模型,考察了白芍中分离得到的大部分单体化合物对T淋巴细胞增殖的影响。结果初步表明,进行测试的18个化合物中,有4个化合物显示不同程度的促进脾淋巴细胞增殖活性。其中化合物20(1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖)的活性最强。进一步的测试结果显示,这4个化合物在5-100μM浓度范围内均显示一定的促进脾淋巴细胞增殖的作用,但未呈现明显的量效关系。测试18个单体化合物对LPS诱导的大鼠腹腔巨噬细胞分泌NO的影响,考察其抗炎活性。结果表明20(1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖)在100μM时可以抑制LPS诱导的大鼠巨噬细胞分泌NO,其余化合物的抑制效果均不明显。对上述分离得到的化合物进行酪氨酸酶抑制活性测试,结果发现化合物20(1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖)在1μM～100gM浓度范围内对酪氨酸酶有显著的抑制作用,并呈现明显的量效关系,IC50约为28.03gM。