脾脏微结节性富于T细胞/组织细胞的B细胞淋巴瘤—免疫表型及基因重排研究

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【研究背景】淋巴瘤是一组起源于淋巴结或其他淋巴组织的淋巴细胞瘤性增生的恶性肿瘤,临床上以淋巴结肿大最为典型,而脾脏是常见的结外受累器官之一。脾脏淋巴瘤是脾脏较常见的恶性肿瘤,可以是全身淋巴瘤的晚期脾脏受累,也可以是原发性淋巴瘤,但以前者较为多见。淋巴瘤在脾脏的病灶,可以是弥漫的细小结节型,也可以是多发肿块型,还可以是单发的巨大肿块型。在病理学上,淋巴瘤可以分为霍奇金(HL)或非霍奇金淋巴瘤(NHL),这两种淋巴瘤均可累及脾脏。脾脏淋巴瘤病理分型多样,掌握其形态学特征,熟悉各类型的免疫表型异同点对诊断与鉴别诊断有重要意义。富于T细胞/组织细胞的B细胞淋巴瘤(T/HRBCL)是一种少见的非霍奇金淋巴瘤,其特征表现为大量反应性增生的小淋巴细胞和/或组织细胞中有散在分布的大细胞。临床上,T/HRBCL发病年龄较小,且男性多于女性;浅表淋巴结为主要原发部位,后期可累及脾脏、肝脏以及骨髓;容易出现B细胞淋巴瘤的症状,如不明原因超过38℃的发热、夜间盗汗以及6个月内体重下降超过10%。原发于脾脏的T/HRBCL十分罕见,在诊断时除形态学特征外,还需结合免疫组化染色及基因重排检测。【目的】1.回顾1999-2008年间20例脾脏原发性淋巴瘤的形态学特征;2.对其中1例伴发丙型肝炎病毒(HCV)感染的特殊淋巴瘤—脾脏微结节性T/HRBCL的免疫表型及基因重排进行深入研究。【方法】1.根据WHO分类标准,对20例标本进行分类;2.应用免疫组织化学EnVision两步法研究病例的免疫表型;3.提取组织的DNA,应用免疫球蛋白基因及TCR基因的特异性引物进行PCR扩增,检测样本是否存在克隆性重排;4.应用激光捕获显微切割(LCM)方法分别切割CD20阳性的大B和小B淋巴细胞,然后提取其DNA,应用免疫球蛋白基因特异性引物进行PCR扩增,进一步研究肿瘤细胞的来源。【结果】1.根据WHO(2001年)关于淋巴瘤的分类标准,20例脾脏原发性淋巴瘤包括:2例外周T细胞淋巴瘤,1例间变大细胞淋巴瘤,8例大B细胞淋巴瘤,4例淋巴浆细胞样淋巴瘤,2例边缘区淋巴瘤,1例滤泡型淋巴瘤,1例小淋巴细胞性淋巴瘤/白血病。除此之外,另有1例微结节性T/HRBCL,并对其形态学、免疫表型以及基因重排进行深入研究。2.特殊病例的形态学、免疫表型以及基因重排结果:1)光镜下见病变呈微结节状,以大量增生的小淋巴细胞和组织细胞为主,其间可见散在分布的大细胞,胞质嗜碱性,核大,呈肾形或马蹄形,染色质疏松,核仁清楚,核周空晕明显,部分类似于霍奇金RS细胞,有大而明显的核仁;2)免疫组化染色示大细胞表达CD20、CD30、EMA;背景细胞中小淋巴细胞表达CD3和CD20,但以CD3为主;组织细胞CD68阳性;3)基因重排结果表明免疫球蛋白轻链呈特异性阳性重排,而未见TCR基因重排,揭示该病例为B细胞来源肿瘤;4) LCM进一步研究发现阳性重排主要来自CD20阳性的小B淋巴细胞。【结论】1.脾脏原发性淋巴瘤以B细胞淋巴瘤为多见,其中最常见的是大B细胞淋巴瘤;2.在WHO分类中,T/HRBCL是一种特殊类型的弥漫大B细胞淋巴瘤,但本例脾脏原发性T/HRBCL的病变特点是突出的微结节性,且可见间变大细胞淋巴瘤样分化;免疫组化染色发现CD3阳性小T淋巴细胞呈优势;更为特别的是小B淋巴细胞为肿瘤性,与上述WHO分类不符,因此,T/HRBCL是否为一新亚型应研究更多病例予以关注;3.本例患者从儿童期即感染了HCV,这是HCV感染可能与本病发生有关的首例报道。
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