黄河三角洲滨海湿地放线菌多样性及活性潜力评估

来源 :中国海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sdsdfe45
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
黄河三角洲地处中国暖温带,自然资源和生物资源丰富。但同时,由于淡水水源供给不足,加上海陆的共同作用,导致水盐的平衡失调,土壤盐碱化程度加重。该湿地的放线菌为了适应盐碱环境,可能存在独特的适应模式以及分子调节机制,很有可能会产生结构新颖的次级代谢产物。因此,研究黄河三角洲滨海湿地放线菌多样性对于放线菌资源的开发和持续利用具有重大的理论及实践意义。采用非培养技术分析了黄河滨海湿地环境中放线菌的多样性,对来自黄河三角洲滨海湿地四个位点的土壤样品构建16S rDNA克隆文库。16S rDNA序列的测序结果表明,位点BZ10的放线菌类群最多,分布于15个属中;位点DY14次之,包括12个放线菌属;位点DY40得到9个放线菌属;位点BZ25获得的放线菌类群最少,仅得到3个不同属。综合四个位点分析,黄河三角洲滨海湿地存在丰富的放线菌多样性,主要分布于放线菌纲(Actinobacteria)和酸微菌纲(Acidimicrobiia)的9个亚目中,分属于10个科,共包括了22个属。还有一些不能确定分类地位的类群,有可能代表新的放线菌类群。采用常规培养方法对包括上述四个位点在内的10个位点的样品进行了放线菌分离培养,分别采用高氏一号、改良淀粉酪素、ISP5、甘油-精氨酸、GW1、丙酸钠、M3和改良高氏一号共8种培养基,以制霉菌素、萘啶酮酸钠和重铬酸钾作为抑制剂,共分离得到165株放线菌。通过表观形态排重可分属于8个类群:白孢类群、黄色类群、粉红孢类群、粉红紫类群、青色类群、烬灰类群、灰褐类群、金色类群。每种类群中挑选形态不同的菌株(每种形态挑选2株)进行16SrDNA测序,结果表明,分离得到的菌株共分布于12个属,主要为Streptomyces属和Nocardiopsis属,还有一些稀有菌属,其中包括1株Agromyces属潜在新种。与非培养获得的放线菌多样性信息相比较发现,两种技术获得的放线菌多样性信息差异较大,由于分离培养技术的限制,环境中大多数的放线菌目前还不能被分离培养,非培养获得的放线菌多样性远多于纯培养获得菌株类群。对分离菌株合成活性次级代谢物的潜力进行了考察。分别采用K1F/M6R、FW/RV和A3F/A7R三对兼并引物进行I型聚酮合酶(PKS-I)、II型聚酮合酶(PKS-II)和非核糖体肽合成酶(NRPS)功能基因的筛选。其中,有9株放线菌含有I型聚酮合酶基因,有11株放线菌含有II型聚酮合酶基因,有6株菌含有非核糖体肽合成酶基因。部分菌株功能基因的氨基酸序列与GenBank已知化合物基因序列的最大同源性较低,预示具有合成结构新颖的化合物的潜力。挑选具有代表性的分离菌株进行抑菌活性的初步探索。采用的方法为琼脂块扩散法,选择了9株指示菌:鳗弧菌、溶藻胶弧菌、副溶血弧菌、白色假丝酵母菌、铜绿假单胞菌、鲍曼氏不动杆菌(编号11927)、鲍曼氏不动杆菌(编号11910)、MRSA(甲氧苯青霉素抗性金黄色葡萄球菌)、MRCNS(甲氧苯青霉素抗性凝固酶阴性葡萄球菌)。共得到22株能够产生抑菌圈的菌株,包括9株链霉菌、8株拟诺卡氏菌和5株芽孢杆菌。除了白色假丝酵母菌和铜绿假单胞菌外,其他的指示菌都能被分离得到的某些菌株抑制,而产生大小不等的抑菌圈,其中菌株OAct388表现出的抑菌效果最好,对6株指示菌有抑制作用;菌株OAct363对5株指示菌具有抑菌作用。本论文的研究结果表明,黄河三角洲滨海湿地蕴藏着丰富的放线菌资源,分离得到的很多菌株为I型聚酮合酶、II型聚酮合酶或非核糖体肽合成酶的潜在生产菌株,同时,抑菌活性实验也显示出很多菌株具有良好的抑菌活性。非培养技术与可培养技术的结合,极大地提高了微生物多样性分析的可靠性,功能基因筛选技术对放线菌活性次级代谢产物的分离具有重要的指导意义。
其他文献
本文基于工程水土流失影响指数法,以拉萨—日喀则铁路为例,利用水土流失影响指数SWII及其7项指标对该工程进行水土流失损益分析.结果表明,该项目的水土流失指数SWII指数为0.3
本文针对目前我国农村地区主要面源污染源——非集约化畜禽养殖废物的现状,建议政府相关部门在对区域畜禽养殖散养户废物的排放和治理进行统一规划的同时,应结合各相关区域的
本文通过对荣华二采区10
期刊
  本文在阐述3S技术特点的基础上,以四川省木里县梭罗沟金矿改扩建工程所在的的梭罗沟和如米沟为研究区,介绍了3S技术在景观格局信息提取的技术要求、数据收集和工作流程,
会议
丘脑底核(subthalamic nucleus,STN)是基底神经节间接环路重要的中继核团,基底神经节功能活动的改变与帕金森病直接相关。临床上常采用深部脑电刺激的方法作为治疗帕金森病的
本文以西安市房地产开发中的中水回用为例,通过调研指出了目前西安市推广中水存在的误区和面临的一系列瓶颈,对现状存在的问题进行了剖析,并从技术管理的角度提出了中水在西
《英语学习》线上系列讨论的第五期话题是“英语课程中的文化意识”。重点讨论了以下几个问题是:为什么要在英语课程中渗透文化意识教学?文化意识的培养应包含哪些内容?怎样
铁氧化物在地球上储量丰富,环境友好。研究铁氧化物在新能源领域的应用吸引着众多研究者的目光。本论文研究了铁氧化物在光解水制氢和锂离子电池两个领域的应用。采用水溶液化学生长法及500℃热处理,制备了掺杂Co或Ni以及未掺杂的α-Fe203纳米棒阵列。通过XRD, SEM和紫外可见吸收光谱对样品进行表征。将样品组装成光电化学池,通过开路电压测试,线性扫描测试以及Mott-Schottky测试研究了掺杂对
高速公路的建设会给生态环境带来各种各样的影响,其影响有直接的和间接的,短期的和长期的,可逆与不可逆等.本文选取高速公路对生态环境影响的因子中的对水土流失的影响和对生
  《环境影响评价技术导则地下水环境》(HJ610-2011)的颁布与实施,对规范煤炭工业建设项目地下水环境影响评价工作,提高地下水环境影响评价的技术水平具有十分重要的意义。然