【摘 要】
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目的: 近年来急性白血病(AL)的治疗,主要是化疗、骨髓或外周血造血干细胞移植,可使其5年生存率明显提高,但化疗后获得完全缓解的病人仍有体内残留白血病灶引起AL复发,因而清
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目的: 近年来急性白血病(AL)的治疗,主要是化疗、骨髓或外周血造血干细胞移植,可使其5年生存率明显提高,但化疗后获得完全缓解的病人仍有体内残留白血病灶引起AL复发,因而清除残留白血病病灶仍是困扰治愈AL的一大难题。我们利用多种细胞因子诱导脐带血产生大量的树突状细胞(DC),并以急性白血病RNA转染脐血源性DC,诱导抗白血病特异性细胞毒T细胞(CTL)的产生,为清除AL患者体内残留灶提供积极有效的免疫学方法。 方法: 取AL患者外周血或骨髓血,以Ficol1淋巴细胞分离液获得单个核细胞(MNC),作为提取自体白血病靶细胞以及白血病mRNA之用,并以Trizol试剂法提取RNA。分离脐血MNC,以2×10~6个细胞/孔接种于12孔培养板,培养体系中加入重组人粒单核细胞集落刺激因子(rhGM-CSF),重组人白细胞介素4(rhIL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α),并在培养第5天,加入白血病mRNA,致敏脐血DC。培养过程中,倒置显微镜观察树突状细胞形态,流式细胞仪(FCM)检测细胞免疫表型。培养第12天收获成熟DC,与自体T淋巴细胞共培养,诱导产生白血病特异性CTL,乳酸脱氢酶法(LDH法)测定该CTL溶靶细胞活性。 结果:
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