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背景:脊髓缺血再灌注损伤(spinal cord ischemic in-jury, SCII)是指当脊髓受到一定的损伤因子攻击时,脊髓神经细胞会缺血一段时间,导致氧供应不足,尽管后来血液重新灌注,但是却引起了明显的功能缺失,有时候甚至出现了迟发型神经元死亡,这种死亡是不可逆转的。在临床的手术中,SCII一直是困扰临床医生的一大难题,而预防SCII的方法的研究也越来越重要。目前,甲强龙(MP)已被国内外医学界认为有确切疗效并得到广泛应用的药物。我们在脊髓手术之前使用大剂量MP冲击治疗来预防脊髓损伤,并已经取得了确切的疗效,病人脊髓损伤症状明显减轻。通过对使用大剂量MP的病人的长期随访,我们发现,虽然病人脊髓损伤明显减轻,但此类病人大剂量激素使用后的并发症远较其他病人为高,同样给病人造成了极大的痛苦。这给临床医生提出了新的难题。目前,使用何种方法在预防SCII的同时能够尽可能地减少其并发症已成为了医学界新的研究方向。这些年来,葛根素作为一种传统中药受到了越来越多的研究,以前的葛根素主要因其扩血管作用而在临床使用,现在很多实验都证明葛根素还有明显的减轻SCII的作用,且作用较其它很多药物明显。本实验采用成组设计的方法,观察低剂量MP与葛根素联用对SCII后脂质过氧化反应的影响,以及功能学和组织学上的改变,通过与大剂量MP的对比,探讨其对SCII的保护作用。目的:通过研究低剂量MP联用葛根素与单用大剂量MP预防SCII的疗效的对比,为减少临床激素的应用提供依据。材料与方法:1实验动物及分组清洁SD大鼠80只随机分为4组:空白组、模型组、阳性药组、治疗组,每组20只。空白组仅手术暴露腹主动脉;其它组均通过夹闭肾下腹主动脉30min[8]造成脊髓缺血再灌注损伤,阳性药组于损伤前30min尾静脉注射30mg/kg MP.治疗组于损伤前30min尾静脉注射10mg/KgMP并30mg/Kg的葛根素,模型组于损伤前30min尾静脉注射与MP组等容量的生理盐水。2模型制作及标本制备10%水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉。应严格遵守无菌操作原则,找出左右肾动脉,然后于两动脉之间夹闭腹主动脉30min后松开恢复血流。空白组于术后3h,后三组均于缺血再灌注后3h各取10只大鼠处死。取出腰段脊髓,匀浆后检测SOD、Na-KATP酶表达水平。恢复血流灌注24h以后,进行后肢运动功能评分,然后处死剩余10大鼠,立即取出结扎部位以下脊髓,将其放置于4%多聚甲醛中固定。常规石蜡包埋、连续横切片,行HE染色。3观察指标与方法3.1后肢神经功能评分后肢神经功能评分采用BBB评分标准3.2SOD、Na-KATP酶的检测将提取的一段脊髓搅拌均匀,离心后取上清液,按试剂盒使用说明进行操作,测定最终反应产物的吸光度。3.3HE染色松开夹子24h后将动物处死,从背部结扎部位以下依次分离软组织层,咬除棘突、椎板,取出脊髓,然后放入4%多聚甲醛中,12小时后行石蜡包埋切片,HE染色后光学显微镜下观察。4统计学处理用SPSS17.0统计分析软件处理实验数据,所有数据均用x±s表示,采用单因素方差分析四组间的整体差异,采用q检验比较组间两两差异,P<0.05认为差异有统计学意义。结果1后肢功能评分后肢运动功能显示:与空白组相比,其它三组运动功能均明显减低,其中阳性药组、治疗组评分明显高于模型组,且差异具有统计学意义(p<0.05),阳性药组和治疗组之间进行比较,两组之间没有明显差异(p>0.05)。2SOD、Na-KATP酶表达水平与空白组相比,再灌注3h后其他三组SOD、Na-KATP酶表达水平均明显减低,但模型组表达水平低于阳性药组、治疗组,差异具有统计学意义(p<0.05),阳性药组和治疗组进行比较,两组之间SOD、Na-KATP酶均没有明显差(p>0.05)。3HE染色阳性药组和治疗组细胞损伤明显低于模型组,阳性药组和治疗组未见明显差异。结论低剂量MP与葛根素联用和大剂量MP都可以有效预防SCII,且两者作用相当,在以后的临床手术中,我们完全可以使用低剂量MP与葛根素联用取代目前的大剂量MP的应用,从而大大减少了大量激素产生的副作用。