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目的为了探究PTEN、p53和BAG-1在三阴乳腺癌中的表达情况及临床病理意义,进一步探讨三者之间的关系,为TNBC的预后评估、患者的个体化治疗等提供一定的参考。方法1.从细胞水平分析,将PTEN-si RNA转染到人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞内,筛选出PTEN缺失的细胞。实验分三组:转染PTEN-si RNA实验组、control-si RNA转染组及无转染的空白组。用Real-time PCR检测PTEN基因m RNA情况,Western blot方法检测蛋白表达情况,来判断si RNA的转染效果。2.利用Transwell侵袭实验及迁移实验检测PTEN沉默后对MDA-MB-231的侵袭、迁移能力的影响,再用Western blot分别检测三组PTEN、p53蛋白及BAG-1的表达情况。3.从临床样本分析,采用免疫组织化学PV法检测89例TNBC中PTEN、p53、BAG-1的表达,并分析其与临床病理学特征的关系。结果1.三组MDA-MB-231细胞Western blot:转染PTEN-si RNA组的PTEN蛋白表达量明显低于其他两组,差异存在着显著性(P<0.01);而control-si RNA组与空白组的PTEN蛋白表达量无明显差异(P>0.1)。三组MDA-MB-231细胞进行Real-time PCR检测,结果表明:转染PTEN-si RNA组PTEN的m RNA表达量明显低于其他两组,差异具有统计学意义(P<0.05);而control-si RNA组与空白组PTEN的m RNA表达量之间无明显差异(P>0.1)。2.Transwell侵袭实验中,实验组/对照组/空白组穿膜的细胞数分别为(221±10.8)个、(125.1±7.6)个、(121.2±10.3)个,三组间差异具有统计学意义(F=23.42,P<0.05);Transwell迁移实验中,实验组/对照组/空白组的穿膜细胞数分别为(342±9.6)个、(249±10.6)个、(261±6.8)个,差异具有统计学意义(F=28.73,P<0.05)。Western blot法结果显示,实验组PTEN沉默后p53、BAG-1蛋白表达量上调,组间差异有统计学意义(P<0.05)。3.89例三阴乳腺癌中PTEN、p53、BAG-1阳性表达率分别为44.9%、47.2%、73.0%,三者的表达均与患者的病理组织学分级、淋巴结转移情况有关(P<0.05)。PTEN的表达与p53、BAG-1表达呈负相关;BAG-1与p53的表达呈正相关。结论1.与其他两对照组相比,PTEN-Si RNA组的PTEN的m RNA、蛋白表达量均有下调(P<0.05),表明成功沉默PTEN基因。2.PTEN表达缺失可以促进人三阴乳腺癌细胞的侵袭和迁移,并且可能上调p53、BAG-1蛋白的表达。3.临床实验结果提示,PTEN、p53和BAG-1基因的表达与TNBC的发生发展密切相关,临床上联合检测三者可能为TNBC预后评估、患者的个体化治疗提供一定的参考。