论文部分内容阅读
鸭疫里默氏杆菌病是主要由鸭疫里默氏杆菌引起雏鸭的一种急性或慢性败血性疾病,发病率和死亡率都很高,是危害养鸭业的主要传染病之一。目前,在该病的药物防治措施方面,主要应用抗生素类和磺胺类药物,但由于抗生素的大量使用,已使RA产生了不同程度的耐药现象,疗效大不如前。本试验通过考察收集鸭疫里默氏杆菌病的临床症状、发病情况、病理变化等各方面的资料,从中兽医辨证论治的角度出发,将鸭疫里默氏杆菌病辨证为肺痈;并结合体外抑菌实验的结果,研制了纯中药注射液“鸭浆新”。对该注射液的质量标准以及部分药效学开展了研究。结果表明:1.在辨证论治的基础上结合对鸭疫里默氏杆菌的体外抑菌试验结果,对处方进行了筛选,结果处方3效果最好:处方3(黄芩:连翘:板蓝根=1:2:1,制成含生药0.5g/mL的注射液)原药液稀释10倍后(50mg/mL)的抑菌圈为20.5±1.2mm,与环丙沙星(2μg/mL)的抑菌效果相当;MIC为7.8mg/mL。根据这个结果将处方3定为该注射液的最终处方。2.高效液相色谱(HPLC)检测“鸭浆新”注射液中黄芩苷含量,色谱条件为:色谱柱:Ultimate XB-C18,5μm,4.6×150mm;检测器:紫外检测器;流动相:甲醇—冰醋酸—水(50+1+50,V/V);流速:1mL/min:柱温:35℃;UV检测波长:274nm;进样量:10μL。检测方法为:精密量取样品溶液1mL分别置于50mL容量瓶中,用流动相稀释至刻度,混合均匀,0.45μm的滤膜过滤,取10μL进样,HPLC检测,记录峰面积,对应标准曲线求出含量。该方法具有稳定、可靠、重现性高、回收率高、结果准确等特点,可作为该制剂含量检测的方法之一。3.电位滴定法检测“鸭浆新”注射液中有机酸含量,检测方法为:精密量取2mL样品溶液,加入10mL50%乙醇溶液以及10mL 0.101moL/L的氢氧化钠溶液,搅拌混匀后置于磁力搅拌器上,再放入复合电极,连接pH计,按照电位滴定法(《中华人民共和国兽药典》2005年版第一部附录52),用0.111moL/L的盐酸溶液进行滴定,记录pH变化,绘制一阶导数曲线[(ΔpH/ΔV)-V],曲线最高点对应的体积即为滴定终点体积,记录数据求出含量。该方法具有稳定、可靠、重现性、回收率高、结果准确等特点,也可作为该制剂含量检测的方法之一。4.通过使雏鸭人工感染鸭疫里默氏杆菌,进而监测整个病程中雏鸭的临床症状和血浆TNF-a、IL-1的含量变化,结合有关TNF-a和IL-1生物学功能研究,证实了大量TNF-a快速释放到血液中,会引起雏鸭全身性炎症反应综合症,同时诱生其他炎性介质,从不同环节参与体内炎症反应,引起多器官组织损伤;IL-1大量释放到血液中作用于神经内分泌系统能引起发热、嗜睡,作用于下丘脑食欲中枢,能减少动物摄取食物,这些作用都是鸭疫里墨氏杆菌病雏鸭出现各种临床症状和病理变化重要原因。5.通过使雏鸭人工感染鸭疫里默氏杆菌,再用“鸭浆新”注射液进行治疗,并与西药对照,监测了整个病程中雏鸭的血浆TNF-a、IL-1的水平变化,验证该注射液对鸭疫里默氏杆菌病治疗的有效性,并阐明该注射液能不仅能杀灭细菌,还能有效拮抗RA释放的内毒素,阻抑炎性因子的释放,同时可能在保护细胞内皮不受损伤,提高机体免疫功能等个方面起作用,共同构成该注射液治疗该病的作用机理。