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本课题针对铁皮石斛（Dendrobium officinale Kimura et Migo）组培生产中存在的根系畸形缠绕、成苗周期长、移栽成活率低等问题，开展了铁皮石斛组培苗控根技术、生长及有效成分积累机理和一次性成苗研究，从香蕉汁浓度、剪根处理和氮源比例对控根技术进行优化，探明铁皮石斛生长及有效成分积累机理，利用组织培养和无土栽培方法探讨铁皮石斛一次性成苗技术，为铁皮石斛工厂化生产提供依据。研究结果表明：1控根技术研究发现：香蕉汁浓度为70g/L控根效果最佳；剪根处理控根作用显著，但不利于植株生长；MS培养基中（NH4+—N）：（NO3-—N）=40:20最佳。2有效成分积累机理研究发现：香蕉汁浓度为90g/L利于有效成分的积累，多糖产量达到3.7368×10-2g，生物碱产量达到2.9×10-5g；一代苗和二代苗剪根后多糖产量明显高于不做剪根处理的，三代苗与之相反。一代苗剪根后生物碱产量差别不大，二代苗和三代苗剪根后生物碱产量低于不做剪根处理的；MS培养基中(（NH4+—N）：（NO3-—N）=60:0多糖产量最佳为4.2323×10-2g，（NH4+—N）：（NO3-—N）=50:10生物碱产量最佳为1.0×10-5g；香蕉与香蕉皮比例为3:1时多糖产量最佳为1.5814×10-2g，香蕉与香蕉皮比例为0:1时生物碱产量最佳为1.9×10-5g；光照强度为2000Lx对有效成分积累的效果最佳，多糖产量达到4.5328×10-2g，生物碱达到1.7×10-5g；双孔盖子的透气条件下多糖产量最佳为2.2325×10-2g，三孔盖子的透气条件下的生物碱产量达最大值1.4×10-5g。3一次性成苗集组织培养和无土栽培方法于一体，具有培养周期短，流程简单，生产成本低，移栽成活率高的特点。在穴盘液体培养过程中，生长在1/4MS营养液中的铁皮石斛鲜重、干重和成活率较好，分别为2.35g、0.19g和92.86%，均优于其他处理。