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背景与目的：肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是我国最常见的消化系统恶性肿瘤之一,其发病率呈增高趋势,目前临床常用的治疗方式如手术切除或肝动脉栓塞化疗术,往往效果欠佳且难以治愈。应用RNA干扰(RNAinterference, RNAi)技术降低肿瘤细胞基因表达,从而改变肿瘤的生物学效应,是目前肿瘤治疗研究的重要方式,为HCC的分子靶向治疗提供理论基础。Livin和Survivin都是凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein, IAP)家族成员,在HCC HepG2细胞中的表达量较正常肝细胞高,且均通过IAP重复结构域(baculovirus-IAP repeat, BIR)发挥凋亡抑制作用,二者在HepG2细胞凋亡抑制的调控中可能具有协同作用。因此,通过联合抑制HepG2细胞中两种基因的表达,以诱导HepG2细胞凋亡,其效果可能优于单一基因抑制。本研究构建Livin及Survivin shRNA真核表达载体,应用RNAi技术,分别联合或单独抑制HepG2细胞中Livin和Survivin基因的表达,以研究联合或单独的基因抑制对肝癌HepG2细胞生物学行为的影响及差异。方法：分别设计、构建靶向Livin或Survivin的shRNA真核表达载体,即pSD11-Livin和pSD11-Survivin,脂质体法单独或联合转染HepG2细胞,分空白对照组、质粒对照组、Survivin组、Livin组和联合转染组。荧光定量PCR(fluorescence quantitive PCR, FQ-PCR)、western blot分别检测HepG2细胞Livin和Survivin的nRNA及蛋白的相对表达量,MTT法、TUNEL法分别检测HepG2细胞增殖和细胞凋亡的变化。应用SPSS16.0统计学软件进行统计学分析,统计量以均数±标准差表示。应用单因素方差分析和Turky检验进行统计学意义评估,P<0.05具有统计学意义。结果：靶向Livin、Survivin的shRNA真核表达载体构建成功。联合转染组HepG2细胞的Livin、Survivin mRNA相对表达量与单独转染组相比均显著降低：联合转染组HepG2细胞的Livin、Survivin蛋白相对表达量与单独转染组相比均具有统计学差异。与单独转染组相比,联合转染组细胞生长抑制率于转染后48h、60h、72h均显著增高,细胞凋亡率明显上升。结论：1. Livin和Survivin基因在HepG2细胞中的表达相互独立,单独抑制IAP家族中一种基因的表达可能不会引起该家族其他基因表达量的改变；2.与单一基因抑制相比,联合转染Livin和Survivin基因表达载体可以更有效的降低Livin和Survivin基因在HepG2细胞中的表达, Livin、Survivin基因在抗凋亡作用机制上可能存在协同；3.联合抑制HepG2细胞Livin和Survivin的表达可更有效的抑制细胞增殖和促进细胞凋亡。