【摘 要】
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本文主要研究内容是从泡菜汁中分离出了高产淫羊藿苷酶的乳酸菌,提酶后检验了酶水解淫羊藿苷的能力,从中筛出能够高产淫羊藿苷酶的菌株。该菌产酶对淫羊藿总苷中多糖基淫羊藿
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本文主要研究内容是从泡菜汁中分离出了高产淫羊藿苷酶的乳酸菌,提酶后检验了酶水解淫羊藿苷的能力,从中筛出能够高产淫羊藿苷酶的菌株。该菌产酶对淫羊藿总苷中多糖基淫羊藿苷具有很好的水解作用,可以得到60%～70%的淫羊藿苷酶解产物,是一种安全高效的新菌。又从20种土壤细菌中筛选出了对淫羊藿苷水解能力高的菌株Rhodanobacter sp.GS3054。通过与乳酸菌水解能力的比较,最终确定细菌Rhodanobactersp.GS3054,该菌株所产的淫羊藿苷酶将多糖基的淫羊藿苷水解成低糖基的淫羊藿苷效果最好。该菌株30℃下发酵3～4d的发酵液提酶后对淫羊藿苷水解能力最佳;本实验提供了将淫羊藿苷水解为低糖基苷的新研究细菌。研究表明:淫羊藿苷酶的最适培养基为培养基V,最适诱导物为槐花,最佳诱导物浓度为1%,25℃的条件下发酵培养120h时最好。粗酶液经DEAE-Cellulose离子交换柱分离提纯后,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳实验测得其为单带,分子量约为34KDa。水解淫养藿苷成低糖基苷的最适反应条件为:50℃、pH=6.0、底物浓度20mg/mL、反应时间24h。在酶反应中,K4+、Mg2+对淫羊藿苷酶的酶反应具有激活作用;而Na+、Cu2+、Ca2+对酶反应的影响不大;Zn2+、Fe3+都不同程度地对淫羊藿苷酶有抑制作用。利用大孔吸附树脂SP207对淫羊藿苷酶解产物进行分离,粗品经硅胶柱层析,最终得到单糖基苷60mg,苷元700mg,其纯度85%以上。
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