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目的：进一步验证乙肝病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)与烯酰辅酶A水合酶(Enoyl CoAHydratase，ECHS1)之间的相互作用，研究这种相互作用对宿主细胞的影响，探讨HBsAg的长期持续表达在HBV致病机制中的作用。方法：采用GST pull-down、免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation，Co-IP)、激光共聚焦显微镜等多种方法进一步验证HBsAg与ECHS1之间的相互作用。应用Western blot技术检测瞬时及稳定表达表面抗原主蛋白(Small hepatitis B surfaceantigen, SHBs)的肝癌细胞系Huh7细胞和HepG2细胞中，ECHS1蛋白表达水平。流式细胞分析技术观察稳定表达SHBs的HepG2-SHBs细胞及对照细胞HepG2-neo对Camptothecin诱导的细胞凋亡的敏感性差异。为研究SHBs导致的ECHS1表达下降是否在SHBs促凋亡中起作用，在HepG2-SHBs细胞中，利用siRNA技术下调ECHS1表达，或者转染pcDNA3.1-ECHS1过表达ECHS1，流式细胞分析技术检测处理前后HepG2-SHBs对Camptothecin诱导的细胞凋亡的敏感性差异。结果：1) SHBs与ECHS1体内、体外存在直接的相互作用。GST pull-down实验中GST-ECHS1蛋白能沉降SHBs，SHBs与ECHS1可在体外发生直接相互作用。免疫共沉淀实验中，用抗SHBs抗体能将ECHS1从细胞裂解液中沉淀下来，接着用抗ECHS1抗体行反向免疫共沉淀实验，抗ECHS1抗体同样能将SHBs沉淀下来。SHBs与ECHS1细胞内存在相互作用。我们采用荧光标签蛋白技术与激光共聚焦显微镜分析技术观察了SHBs与ECHS1的亚细胞定位。SHBs与ECHS1可以在细胞浆中发生共定位。2) SHBs与ECHS1相互作用影响了ECHS1蛋白表达水平。在瞬时及稳定表达SHBs的Huh7细胞和HepG2细胞中，ECHS1蛋白表达水平均明显下降。3) SHBs可以显著增强了肝细胞对camptothecin诱导凋亡的敏感。诱导剂camptothecin处理后，HepG2-SHBs细胞中凋亡细胞数较对照组HepG2-neo明显增多。4)ECHS1在SHBs促凋亡的过程中的可能发挥着重要作用。ECHS1的siRNA转染HepG2-SHBs细胞后，不仅进一步降低了细胞中的ECHS1的蛋白水平，更重要的是ECHS1的表达下降导致camptothecin诱导下的细胞凋亡数明显增多。反之，在HepG2-SHBs过表达的ECHS1， camptothecin诱导的细胞凋亡数减少。结论：SHBs与ECHS1发生相互作用，降低了ECHS1的表达，SHBs增强了肝细胞对凋亡诱导剂诱导细胞凋亡的敏感，SHBs导致的ECHS1的表达下降在SHBs促凋亡效应中发挥重要作用。这为HBsAg直接的致肝细胞损伤提供了一新的依据，提示了HBsAg的一种新致病机制。