【摘 要】
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螯合金属亲和膜因具备便宜易得、选择性高、渗透通量大等优点,在纯化蛋白的研究中受到广泛关注。本文以牛血清白蛋白(BSA)为分离目标,制备了一种螯合金属亲和膜,同时对螯合金属
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螯合金属亲和膜因具备便宜易得、选择性高、渗透通量大等优点,在纯化蛋白的研究中受到广泛关注。本文以牛血清白蛋白(BSA)为分离目标,制备了一种螯合金属亲和膜,同时对螯合金属亲和膜吸附机理进行深入研究。全文研究包括三部分:首先确定了制膜的较佳条件;然后建立比较符合螯合金属亲和膜真实吸附过程的数学模型,用以描述其分离机理;最后验证模型的准确性。以盐酸水解过的尼龙66膜为亲和膜介质,N,N’-羰基二咪唑(CDI)为活化剂,亚胺基二乙酸(IDA)为螯合剂,金属离子Cu2+为配位基,制成了尼龙螯合Cu2+亲和膜。由实验结果可得,先用1mol/L盐酸,在55℃水浴条件下水解尼龙66膜72h,水解后伯胺基含量可达90.0μmol/g干膜;再用0.5g/100ml CDI丙酮溶液于50℃水浴条件下活化2~4h,可得伯胺基活化量为74.9μmol/g干膜。最后用9.0g/100ml IDA水溶液于40℃水浴条件下偶联15h,可接上21.4μmol/cm1铜离子量。建立较符合螯合金属亲和膜真实吸附过程的数学模型,用以描述其分离机理,并选用PDE-系数型模式求解该模型。该模型可有效准确地预测穿透时间、饱和时间、溶质回收率以及配基利用率等随各模型参数变化的影响。考察了BSA溶液的初始浓度和溶液pH值对亲和膜吸附BSA的影响,结果表明,较高BSA浓度和较高pH值有利于BSA的吸附,且所制备的尼龙螯合铜离子亲和膜对BSA的近似最大吸附量为74.3mg/g干膜。最后通过实验获得孔隙率、膜上最大吸附量、扩散系数等模型参数值,利用该模型对动态实验数据进行拟合,进一步验证了模型的准确性。
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