牛结核病是由牛分枝杆菌感染引起的疾病,对世界养牛业乃至全世界的食品安全和人类健康均产生很大的影响。长久以来的研究都将巨噬细胞作为结核菌感染的主要宿主细胞,但是随着中性粒细胞生理功能的逐步研究明了,其在结核菌感染中的作用也越来越受到人们的重视。中性粒细胞是机体受到感染后最先游走到感染部位的细胞成分,属于机体天然免疫反应的第一道防线,其在对抗胞内菌感染中也起着不可忽视的作用。本研究着眼于中性粒细胞在牛分枝杆菌感染的不同阶段中所发挥作用的不同,研究了在急性感染和慢性感染阶段,即中性粒细胞在机体的抗结核免疫反应中包括固有免疫和获得性免疫阶段所发挥的抗菌防御和致病机理中可能发挥的作用。1.本研究利用体外感染试验来模拟在牛结核病急性感染的早期阶段,检测了牛中性粒细胞的功能改变如表型变化、凋亡率以及炎性因子表达等。实验数据表明中性粒细胞受到牛分枝杆菌刺激后,发挥吞噬功能并启动抗菌程序,但是并不能完全清除感染,反而在牛分枝杆菌的刺激下能够促使中性粒细胞以坏死的形式走向死亡；自噬可能参与中性粒细胞杀菌的过程。2.本研究以从小鼠分离的原代的中性粒细胞细胞为模型,检测了经过牛分枝杆菌感染的小鼠中性粒细胞其上清液作为刺激剂对巨噬细胞、树突状细胞、淋巴细胞、Ⅱ型肺泡上皮细胞等已经被证实参与在肺脏微环境下抗结核感染中的细胞成分的激活效应。数据表明,中性粒细胞感染结核菌后的旁分泌效应能够有效的激活巨噬细胞并增强其杀菌能力；在一定程度上促进树突状细胞的激活和成熟；能够增强Ⅱ型肺泡上皮细胞抗炎因子等的分泌活性。3.本研究对正常牛外周血中性粒细胞体外经牛分枝杆菌感染刺激后以及牛结核病感染牛的外周血中性粒细胞其表达干扰素诱导转录基因以及中性粒细胞的PTX3基因和MPO基因的变化进行了检测。实验数据显示在牛结核病慢性感染过程中,外周血中性粒细胞的干扰素诱导转录基因的表达具有一定的特异性。