紫贻贝体内重金属镉的富集代谢及脱除方法研究

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本论文针对养殖双壳贝类受重金属污染严重,富集重金属难以脱出等问题,以紫贻贝为研究对象,利用带鱼下脚料制备带鱼蛋白水解肽,将其与金属元素螯合制备蛋白水解肽-金属配合物,研究该配合物对紫贻贝体内不同组织器官中重金属Cd的脱除效果,以期发明一种高效、经济、环保脱除水产品富集重金属的方法,为人类健康提供安全放心水产品。本研究内容包含以下几部分:1.以紫贻贝为研究对象,研究重金属Cd对紫贻贝的急性毒性,以及重金属Cd在紫贻贝内脏团、前闭壳肌、后闭壳肌、外套膜、鳃中的生物富集及释放特征。结果如下:(1)急性毒性:Cd对紫贻贝的半数致死浓度为6.9586 mg/L,95%可信区间为1.8201-26.6024 mg/L,安全浓度为0.0696 mg/L。(2)富集阶段:不同器官中Cd富集量随富集时间、水体Cd浓度增加而增大(P<0.05);富集第15 d,内脏团、前闭壳肌、后闭壳肌、外套膜和鳃中,Cd含量依次为145.56、11.826、28.143、22.394和66.113mg/kg;不同器官对Cd的吸收速率常数(k),富集初期较高、中期有所减弱、后期再次升高;生物富集系数(BCF)随外界Cd浓度增加而逐渐减小;相同富集时间下,4种器官k和BCF值,均表现为内脏团>鳃>后闭壳肌>外套膜>前闭壳肌;4种器官中Cd富集量与时间之间关系,均符合Harris模型(Y=1/(a+b Xc)),拟合R~2范围为0.9286~0.9890。(3)释放阶段,4种器官中Cd含量均未表现出显著性下降趋势(P>0.05),表明紫贻贝对Cd的代谢释放能力较弱,为典型Cd净积累型生物。2.以低值带鱼加工副产物为研究对象,研究利用木瓜蛋白酶水解制备带鱼蛋白酶解液的最佳条件,及其与金属元素螯合、制备蛋白水解肽-金属配合物的最佳条件,制备足量铁肽、锌肽、钙肽和镁肽。结果如下:(1)酶解最佳工艺条件:酶解时间为6 h、p H6.5、温度45℃和加酶量为20000 u/g时,带鱼酶解液水解度达到71.3%。(2)螯合最佳工艺条件:温度为30℃、p H7.0、时间为30 min时,制备铁肽、锌肽、钙肽和镁肽表现出最高金属螯合率,分别为68.9%、65.7%、63.2%和42.3%。3.以紫贻贝为研究对象,铁肽、锌肽、钙肽、镁肽饲喂染Cd紫贻贝,探究紫贻贝内脏团、前闭壳肌、后闭壳肌、外套膜、鳃中Cd的释放脱出规律。结果如下:(1)紫贻贝0.32 mg/L Cd暴露5 d后,其前闭壳肌、后闭壳肌、鳃、外套膜和内脏团富集Cd浓度分别是11.391、15.323、63.672、19.509、109.62 mg/kg。(2)净化脱出实验后,5 mg/L的铁肽、锌肽、钙肽对紫贻贝各组织器官中Cd无显著性脱出效果(P>0.05);20 mg/L的铁肽、锌肽、钙肽处理组具有显著脱出效果,前闭壳肌、后闭壳肌、鳃、外套膜和内脏团中Cd的浓度分别降低29.56~35.83%、27.51~33.62%、31.59~40.34%、25.83~31.28%、33.62~33.97%;5~20 mg/L的镁肽处理组各部位中Cd浓度的变化与对照组没有显著性差别。(3)铁肽、锌肽、钙肽可作为脱除贻贝中重金属Cd的去除剂。
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