红曲霉胞外多糖的产量提高及纯化、结构研究

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该文研究了通过三种不同途径提高红曲霉胞外多糖产量:通过菌种改良研究,经Co<60>诱变,筛选得到两株色素缺陷兼胞外多糖高产菌株Z-17和N-18,其胞外多糖产量最高比原菌株提高约50﹪;通过一系列的单因素和正交试验,优化确定了产胞外多糖的培养基组成:麦芽糖60g/L,蛋白胨2.5g/L,磷酸二氢钾4g/L,硫酸镁0.5g/L,氯化钙0.6g/L.优化确定了其发酵条件:500ml三角瓶装培养基75ml,接种量15﹪,种子液种龄24h,培养温度33℃,摇床转速220r/min,培养96小时;同时研究了油脂对胞外多糖产生的影响,确定棕榈油的添加量为0.2/100ml条件下,胞外多糖产量得到提高.在上述培养条件下,生物量干重为1.42g/100ml,发酵液胞外多糖产量可达3.24g/L.比初始条件高出2.5倍.对红曲霉胞外多糖的纯化进行了研究,确定了红曲霉胞外多糖的纯化工艺:发酵浓缩液→醇沉去除醇溶性杂质→乙醚脱脂→Seveg法去蛋白→透析除盐→DEAE-纤维素离子交换柱组分分离→SepharoseCL-6B凝胶柱分级分离→真空浓缩→冷冻干燥.优化确定了胞外多糖的纯化条件.经DEAE-纤维素离子交换柱分离到三个组分.其中组分Ⅰ经SepharoseCL-6B凝胶柱分级纯化得到组分YZ-1、YZ-2.组分Ⅲ纯化得到三个组分YZ-3、YZ-4、YZ-5.经高效液相色谱检测:分离得到的各种多糖组分纯度都符合要求.
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