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土槿皮乙酸（PAB）是从松科植物金钱松的根皮中分离的二萜酸,具有抗肿瘤、抗生育等作用。本文对土槿皮乙酸体外抗肿瘤活性进行了较为系统的研究,主要阐述了土槿皮乙酸在两种肿瘤细胞:人乳腺癌MCF-7细胞和鼠成纤维肉瘤L929细胞中抑制细胞生长的机制。在人乳腺癌MCF-7细胞中,土槿皮乙酸诱导凋亡,自噬,衰老及M期周期阻滞。土槿皮乙酸在36和48h的IC50分别是3.4和1.35μM。4μM土槿皮乙酸处理36h,MCF-7细胞DNA出现片段化,凋亡小体增加。其凋亡通路主要是土槿皮乙酸激活蛋白酪氨酸激酶（PTKs）,PTKs激活JNK并抑制ERK的活化,进而诱导MCF-7细胞凋亡。但MCF-7细胞的凋亡与Fas死亡受体途径无关。在土槿皮乙酸诱导凋亡的过程中,有一部分细胞因为自噬而逃逸凋亡机制,最终成为衰老的细胞。这部分细胞在4μM土槿皮乙酸作用36h时,MDC染色阳性,Beclin 1表达上调,LC3Ⅰ转变为LC3Ⅱ（自噬）。而在4μM土槿皮乙酸处理3d,去药培养5d的时候存活细胞变大变扁平,SA-β-galactosidase染色为蓝色（衰老）。在研究细胞周期阻滞的过程中,4μM土槿皮乙酸在36h时显著上调细胞核内的cyclinB1和cdc2而诱导M期细胞周期阻滞。同时土槿皮乙酸上调p21和p53的表达,说明p21和p53有可能参与M期周期阻滞和凋亡。而M期周期阻滞有可能与自噬,凋亡和衰老相关。在鼠成纤维肉瘤L929细胞中,土槿皮乙酸不诱导凋亡,但诱导自噬,衰老和M期周期阻滞。80μM土槿皮乙酸在36h的抑制率是65.37±4.12%,但不诱导凋亡小体的出现。而80μM土槿皮乙酸上调Beclin1的表达,增加MDC染色阳性率,促进LC3Ⅰ转变为LC3Ⅱ。说明土槿皮乙酸诱导L929细胞自噬,但不诱导凋亡。在自噬研究中,80μM土槿皮乙酸上调Bax,Bcl-2和Bcl-ⅹL的表达,但不影响线粒体膜电位,主要是因为土槿皮乙酸抑制凋亡蛋白Bax定位在线粒体,而促进抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-ⅹL定位在线粒体。与此同时我们观察到土槿皮乙酸促进胞浆中Bcl-2的磷酸化。免疫沉淀试验显示80μM土槿皮乙酸抑制Bcl-2和Beclin 1的结合,这有可能是因为Bcl-2主要分布在线粒体,而分布在胞浆的Bcl-2被磷酸化,从而降低了其结合Beclin 1的作用,从而促进自噬的发生。在研究caspase与自噬的关系时,发现土槿皮乙酸不激活caspase 8,caspase 9和caspase 3。同时caspase家族抑制剂抑制土槿皮乙酸诱导的自噬,而促进L929细胞的凋亡。在研究细胞周期阻滞的过程中,发现土槿皮乙酸上调细胞核中的cdc2和cyclinB1的表达,说明其诱导的四倍体细胞阻滞于M期。荧光显微镜观察到土槿皮乙酸诱导L929细胞多核的生成。而细胞的M期阻滞和细胞的多核性有可能是土槿皮乙酸作用后L929细胞变大的原因。但土槿皮乙酸与PKC的抑制剂联用后,细胞核内cdc2和cyclinB1的表达降低,也抑制了M期周期阻滞及细胞的多核性的产生。说明土槿皮乙酸在这个过程中激活了PKC。在土槿皮乙酸作用L929细胞3d后,L929细胞不再增殖,同时衰老特异性染色为阳性。