化疗是目前肿瘤治疗的主要手段之一，但有时其疗效不佳，而肿瘤的多药耐药性(multidrug resistance, MDR)是造成恶性肿瘤的化疗效果不理想的重要原因之一。突破肿瘤的多药耐药障碍，提高化疗药物的治疗效果，是目前肿瘤基础和临床研究的重点和热点。目前国内外比较公认的耐药机制主要有：1.细胞膜的药物转运蛋白将药物外排增加；2.肿瘤细胞对抗肿瘤药物的解毒功能增强； 3.药物靶酶改变导致对药物敏感性下降；4.DNA修复功能增强；5.蛋白激酶C活性增高；6.微管基因的作用。但一些肿瘤组织的耐药表型并不一定都存在上述机制，用经典的多药耐药理论不能完全解释，这提示可能还有其它的耐药机制存在。随着分子生物学及相关学科的飞速发展，一些新的基因克隆技术的应用，不断有新的耐药相关基因片段被发现，研究这些新的基因相关片段的表达情况，有利于我们进一步发现新的肿瘤多药耐药机制。本研究主要是检测我们前期工作中通过抑制消减杂交技术所获得的两条新肺腺癌多药耐药相关基因cDNA片段(分别命名为目的基因片段A1,A2)在多种肿瘤组织及其相应的癌旁正常组织中的表达情况。方法：(1) 通过手术切除，获取几种病理确诊且未经化疗的癌组织及其癌旁正常组织标本，其中肺癌22例(肺腺癌12例、肺鳞癌8例、小细胞肺癌2例)、胃癌20例、肝癌4例、肾癌3例,所取标本立即放入液氮中保存；(2) 通过细菌培养扩增含有目的基因cDNA片段(A1,A2)的质粒，用碱裂解法大量提取质粒，然后用限制性内切酶EcoR I酶切所获得的质粒并用V型电泳槽回收目的基因片段，用地高辛和32P分别将回收的目的基因片段标记为探针；(3)运用原位杂交技术分别确定这两条cDNA片段在细胞中的表达及定位情况；(4)通过Northern blot 的方法来验证这两条cDNA片段在肿瘤组织及癌旁正常组织中的相对表达量。结果：(1)成功地将获得的目的基因片段(A1,A2)标记为符合实验要求的探针。(2)组织原位杂交结果显示：对于目的基因片段A1，在12例被检测的肺腺癌标本中有10例表达阳性（占83.3%）,在16例被检测的胃腺癌标本中有12例表达阳性（占75%）,在肺鳞癌、小细胞肺癌、胃印戒细胞癌、肝癌、肾癌及正常组织中无表达；对于目的基因片段A2，在12例被检测的肺腺癌标本中有6例表达阳性（占50%）,在16例被检测的胃腺癌标本中有7例表达阳性（占43.75%）,在肺鳞癌、小细胞肺癌、胃印戒细胞癌、肝癌、肾癌及正<WP=9>常组织中无表达。(3)Northern blot的检测结果显示：对于目的基因片段A1，在12例被检测的肺腺癌标本中有8例表达阳性（占66.7%）,与其对应的癌旁正常组织中无表达，二者相差非常显著(P<0.01)，在16例被检测的胃腺癌标本中有12例表达阳性（占75%）, 与其对应的癌旁正常组织中无表达，二者相差非常显著(P<0.01)，在肺鳞癌、小细胞肺癌、胃印戒细胞癌、肝癌、肾癌及正常组织中无表达；对于目的基因片段A2，在12例被检测的肺腺癌标本中有6例表达阳性（占50%）, 与其对应的癌旁正常组织中无表达，二者相差非常显著(P<0.01)，在16例被检测的胃腺癌标本中有7例表达阳性（占43.75%）, 与其对应的癌旁正常组织中无表达，二者相差非常显著(P<0.01)，在肺鳞癌、小细胞肺癌、胃印戒细胞癌、肝癌、肾癌及正常组织中无表达。结论：(1)这两条目的基因片段(A1,A2) 在肺腺癌组织、胃腺癌组织中有表达；(2) 结合我们的实验结果及其他一些相关实验结果，我们推断这两条目的基因片段通过化疗药物的诱导后表达可进一步增强；(3)这两条目的基因片段与肿瘤MDR的产生可能有一定的关系，可能是两条新的肺癌耐药相关基因片段，对其功能的进一步研究，将有利于从一个新的角度了解肿瘤多药耐药形成的机制。