研究背景延迟性再植指牙齿离体干燥60 min或更长时间的再植,在这种情况下牙根表面的牙周膜细胞基本坏死,当根面残留大量坏死细胞的情况下进行再植,坏死组织和细胞可能激发相关炎性细胞和破骨细胞活性,加速牙根吸收进程,这是导致再植失败的主要原因。国际牙外伤协会2012年治疗指南建议牙齿完全脱位时延迟性再植前应该去净牙根表面的坏死牙周膜,目前去除坏死牙周膜的方法大致分为机械法、化学法。而所有研究均是采用单一的方法来去除牙根表面的坏死牙周膜,尚无研究将机械法、化学法联合应用于同一患牙上。目的观察化学机械联合法去除延迟性再植牙坏死牙周膜效果,以及对延迟性再植牙牙周愈合的影响。材料与方法第一章:观察化学机械联合法去除延迟性再植牙坏死牙周膜效果。搜集临床因正畸需求拔除的前磨牙40颗,室温干燥1小时,亚甲基蓝染色5min。将样本随机分为4组,每组10颗离体牙(n=10):空白对照组、机械组(纱布擦拭去除牙周膜)、化学组(1%次氯酸钠浸泡去除牙周膜)、化学机械联合组(纱布擦拭联合1%次氯酸钠浸泡去除牙周膜),牙根处理时间15min,分别进行光学显微镜和扫描电子显微镜观察。第二章:观察化学机械联合法中不同浓度次氯酸钠溶液去除延迟性再植牙坏死牙周膜效果。临床搜集近期需做因正畸需求拔除的前磨牙210颗,室温干燥1小时,亚甲基蓝染色5min,将样本随机分为7组(n=30),分别为阴性对照组(纱布擦拭牙根1min后生理盐水浸泡15min)、1%次氯酸钠溶液组、2%次氯酸钠溶液组、5.25%次氯酸钠溶液组、纱布+1%次氯酸钠溶液组、纱布+2%次氯酸钠溶液组、纱布+5.25%次氯酸钠溶液组。分别进行光学显微镜和扫描电子显微镜观察、X射线能谱仪分析以及检测细胞粘附和增殖情况。第三章:建立延迟性再植牙动物模型,观察化学机械联合法对延迟性再植牙牙周愈合的影响。将四周龄Wistar雄性大鼠随机分为4组(n=6):即刻再植组、阳性对照组(牙根表面不做任何处理再植)、机械组(单纯纱布去除牙周膜后再植)、化学机械联合组(纱布+1%次氯酸钠去除牙周膜后再植),MicroCT扫描牙根进行3D成像,统计牙根位点吸收情况。结果第一章:空白对照组观察到坏死的牙周膜遍及牙根表面,机械组和化学组见牙周膜残留,化学机械联合组未见牙周膜残留,四组牙骨质完整。第二章:纱布+生理盐水组观察到坏死的牙周膜遍及牙根表面,1%次氯酸钠15min组观察到牙周膜残留,牙根表面完整;其余各组未见牙周膜残留,2%次氯酸钠处理10min和5.25%次氯酸钠处理5min的牙根表面见裂纹,化学组与化学机械联合组部分元素的质量百分比差异没有统计学意义,2%次氯酸钠作用10min与5.25%次氯酸钠作用5min后牙骨质表面的钠元素、氯元素质量百分比与1%次氯酸钠作用15min相比,差异有统计学意义(p<0.05),钠、氯元素的质量百分比与次氯酸钠的浓度呈正相关;2%次氯酸钠作用10min与5.25%次氯酸钠作用5min后牙骨质表面的磷元素、钙元素质量百分比与1%次氯酸钠作用15min相比,差异有统计学意义(p<0.05),钙、磷元素的质量百分比与次氯酸钠的浓度呈负相关。各组牙骨质片上牙周膜细胞的粘附和增殖能力差异有统计学意义(p<0.05)。同一浓度下,化学组与化学机械联合组间的OD值差异没有统计学意义(p>0.05),细胞培养24h时,化学组/化学机械联合组与纱布+生理盐水组比较,OD值差异有统计学意义(p<0.05)。随着次氯酸钠浓度升高,OD值逐渐降低。72h时,1%次氯酸钠作用15min与纱布+生理盐水组的OD值差异没有统计学意义(p>0.05),2%次氯酸钠作用10min及5.25%次氯酸钠作用5min的OD值与纱布+生理盐水组相比,差异有统计学意义(p<0.05),浓度越高,OD值越低。第三章:即刻再植组、阳性对照组、机械组、化学机械联合组这四组的正常牙骨质位点数和牙根外吸收位点数差异有统计学意义(p<0.05)。牙根外吸收位点数从高到低依次为:阳性对照组>机械组>化学机械联合组>即刻再植组。四组的牙根位点吸收率差异有统计学意义(p<0.05),从高到低依次为:阳性对照组>机械组>化学机械联合组>即刻再植组。结论本研究通过体外、体内实验发现次氯酸钠应用于延迟性再植牙坏死牙周膜去除的安全浓度为1%,作用于牙根表面15min不会引起牙骨质的破坏,与纱布联合可以彻底去除坏死牙周膜,不破坏牙骨质表面结构,不抑制细胞增殖,减少延迟性再植牙根吸收。