线粒体DNA对脓毒症急性肺损伤的影响及与TLR9/p38信号通路的相关研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhuliangmike
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目的:探究血浆线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)水平对脓毒症大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响及与肺组织TLR9/p38信号通路的关系。方法:将健康雄性SD大鼠,采用随机数字法表分为4组(n=15):假手术组(sham组),脓毒症组(sepsis组),脓毒症+mtDNA组(sepsis+mtDNA组),脓毒症+mtDNA+ODN组(sepsis+mtDNA+ODN组)。采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and perforation,CLP)建立脓毒症模型,分离大鼠肝脏提取mtDNA,并于CLP术后腹腔注射140mg/kg mtDNA,CLP术前腹腔注射TLR9受体阻滞剂ODN2088 100mg/kg。Sham组和sepsis组腹腔注射等量无菌生理盐水。分别于CLP术后6小时、12小时经心脏采集血液标本、收集右肺肺泡灌洗液和左肺肺组织。QPCR法检测血浆mtDNA浓度及肺组织TLR9/p38 mRNA相对表达;BCA法测肺泡灌洗液总蛋白浓度、HE染色观察肺组织病理改变、肺组织病理评分,并测肺水含量、肺泡灌洗液白细胞计数,评估肺损伤程度。结果:通过CLP术成功建立中度脓毒症大鼠模型,经检测大鼠肺组织病理符合ALI病理改变。与sham组比较,sepsis组大鼠死亡率、ALI程度、血浆mtDNA水平、肺组织TLR9/p38 mRNA相对表达均明显升高(p<0.05)。腹腔注射mtDNA,可导致脓毒症大鼠以上改变加重(p<0.05)。Sepsis+mt DNA+ODN组大鼠经TLR9受体特异性抑制剂ODN预处理较sepsis+mtDNA组以上改变可明显改善(p<0.05)。结论:血浆mt DNA可促进脓毒症ALI疾病进展。此过程受TLR9/p38信号通路调控。
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