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本文以重要的植物寄生性线虫（根结线虫）为靶标，利用系统筛选技术筛选出了具有高杀线虫活性的1株真菌za-130，并对该菌的分类地位、线虫的室内防效、菌株的发酵条件和安全性评价进行了初步研究，在此基础上分离鉴定了杀线虫的活性产物；此后通过限制性内切酶介导技术建立了该菌株的随机插入转化子库，并筛选到了具有更高杀线虫活性（原始菌株1.5倍以上活性）的转化子20株，同时分离到了菌株za-130中可能与杀线虫活性物质产生途径相关的候选基因序列片段。主要结果如下：1．采用摇瓶发酵初筛，从全国618份土壤中分离的1319份真菌菌株中获得了具有杀南方根结线虫活性的真菌菌株127株，其中能够全部击倒根结线虫二齢幼虫的有29株。经不同浓缩倍数处理后多次重复试验筛选，从上述29株真菌中筛出杀线虫活性高、重复性好的菌株1株，编号为za-130。形态学鉴定za-130为里西裸囊菌（G. reesii）。温室盆栽防效试验显示：za-130发酵浓缩5×液在45d和80d对番茄根结线虫的防治效果均在80%以上；安全性评价试验表明za-130急性经口毒性和急性经口半数致死量（LD50）均属于“微毒”级，对动物和人类安全无毒。上述结果显示za-130对番茄根结线虫具有较好的防治效果，该菌株具有潜在的研究和开发前景。2．za-130发酵液经5倍无水乙醇沉淀，再经大孔吸附树脂、硅胶柱层析和Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱层析等分离，最后经过HPLC循环制备并经冷冻干燥，得到了纯度为98.296%的杀线虫活性物质纯品。za-130杀线虫活性物质纯品为浅黄色粉末状物质，分子量为326，紫外吸收峰在275nm；红外光谱图谱显示za-130纯品具有亚甲基、羟基、碳碳双键等基团，元素分析表明其含有C、H和O三种元素，核磁共振1H、13C、dept135、COSY、HMQC、HMBC图谱，可以初步推测上述纯品为5,5（oxybis（hydroxymethylene））bis（4H-pyran-2-carboxylicacid）。该纯品具有良好的光、热、酸碱稳定性，同时其具有良好的光、热、酸碱稳定性。3．菌株za-130发酵培养基以玉米淀粉为最佳碳源，以食品发酵鲜鱼蛋白胨为最佳氮源。发酵的最佳培养基配方为：2.0%玉米淀粉+0.4%食品发酵鲜鱼蛋白胨+0.1%K2HPO4+0.03%MgSO4+MnCl（20.1mmol/L）。最佳发酵条件为：225℃～28℃、pH6.5、液体种子培养48h、接种量10%、250mL三角瓶装20mL～50mL、摇床转速以150r·min-1～200r·min-1、发酵120h。4．通过摸索Za-130原生质体制备过程中的细胞壁酶类型及浓度、摇培时间、裂解时间和再生培养基种类，建立了Za-130的原生质体制备方法和再生体系，并在此基础上，通过PEG介导的转化方法，将GFP标记载体转入Za-130，建立了G. reesii高效的遗传转化体系，同时成功获得了GFP荧光标记高效表达的菌株。5．通过对限制性内切酶介导的转化（REMI）的方法的优化，建立了Za-130的高效REMI转化体系，并获得了含有1182个独立转化子的随机插入转化子库，通过生物测定筛选，初步获得了显著提高杀线虫活性的转化子20株，其中编号为Gr-M286的菌株比野生型菌株活性提高3倍以上。在此基础上，通过Southernblot确认了Gr-M286为单拷贝、单位点插入突变体，通过质粒拯救获得了插入位点的部分侧翼序列。