【摘 要】
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目前对于多糖含量的测定方法多为比色法中的苯酚硫酸法和蒽酮硫酸法,以及3,5-二硝基水杨酸滴定法,以上的这些方法都存在着需要对样本进行预处理,并且测定过程复杂危险,操作繁琐,速度缓慢,效率低等问题。近红外光谱技术具有高效快捷无损等优点,近年来在各领域应用广泛,近红外光谱技术结合化学计量学方法快速测定某组分含量,建立多种组分快速测定的方法等研究已是现代研究热点。在本课题的研究中,利用苯酚硫酸法测定铁皮
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目前对于多糖含量的测定方法多为比色法中的苯酚硫酸法和蒽酮硫酸法,以及3,5-二硝基水杨酸滴定法,以上的这些方法都存在着需要对样本进行预处理,并且测定过程复杂危险,操作繁琐,速度缓慢,效率低等问题。近红外光谱技术具有高效快捷无损等优点,近年来在各领域应用广泛,近红外光谱技术结合化学计量学方法快速测定某组分含量,建立多种组分快速测定的方法等研究已是现代研究热点。在本课题的研究中,利用苯酚硫酸法测定铁皮石斛的多糖含量,柱前衍生测定单糖组成和甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖四种单糖的含量,为了提高多糖及四种单糖含量的测定速度,提出利用近红外光谱技术,结合偏最小二乘法,快速高效的测定铁皮石斛多糖以及其中典型单糖的含量,为快速测定大规模的铁皮石斛样本的多糖及单糖含量提供可能。主要结果如下:（1）响应面优化超声波辅助热水浸提铁皮石斛多糖提取工艺,单因素实验结果确定超声时间对多糖提取率影响不大,根据响应面结果确定铁皮石斛多糖最佳提取工艺为料液比1:50,提取温度85℃,提取时间为120min,模型预测该条件下多糖提取率为40.30%,经验证多糖提取率为40.33%,超声辅助多糖提取工艺,显著增强多糖的提取率。（2）采集铁皮石斛多糖样本的近红外光谱图,联用偏最小二乘法建立多糖含量快速测定模型,在此过程中逐一回收异常样本,不断改变预处理方式,确定铁皮石斛多糖模型的最佳预处理方式为标准归一化（SNV）+一阶+N平滑组合处理,比较不同建模范围的建模结果,最终得到校正集均方根误差（RMSEC）为0.569,校正集相关系数（RC~2）为0.9596,验证集均方根误差（RMSEP）为0.868,验证集相关系数（RP~2）为0.9385的铁皮石斛多糖含量快速测定模型,实现快速测定铁皮石斛多糖含量。（3）利用PMP衍生多糖水解液并测定单糖组成和Man、Glc、Gal和Ara的含量。建立四种单糖含量的快速测定方法,RMSEC分别为0.769,0.390,0.00291和0.00285,RMSEP分别为0.812,0.277,0.00332,0.00440,且RC~2和RP~2均大于0.9000,预测性能较好,可利用建立模型进行铁皮石斛四种单糖的快速测定。（4）本研究确定了铁皮石斛多糖的最佳提取工艺,最大程度的提取并测定多糖含量,建立了铁皮石斛多糖含量快速测定方法。探究了铁皮石斛的单糖组成并建立铁皮石斛中甘露糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖四种单糖含量的快速测定方法,结果说明偏最小二乘法与近红外光谱技术结合快速测定多组分含量的方法是可行的,所建立的模型皆可用于高效快速的测定各组分含量。
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