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传染性非典型肺炎,世界卫生组织命名为严重急性呼吸系统综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS),是一种由变异冠状病毒(SARS-associated coronavirus,SARS-CoV)感染引起的急性呼吸道传染性疾病,具有传染性强,病情重,进展快,危害大等流行病特点。对人生命健康和经济发展影响甚大。 目前现代医学对SARS主要采用对症支持疗法,国内外也长期致力于抗病毒药物的研制及疫苗的开发。但是一项新的药物研发周期长,且病毒结构和入侵部位的特殊性,及病毒容易产生变异,使疫苗的研制难以跟上传染病不断变化和增多的现况。因此寻找有效的抗冠状病毒药物,是全世界和我国疾病防治中的重点。 中医药防治病毒性传染病具有一定的优势,彭胜权教授根据既往治疗呼吸道病毒感染疾病的经验以及本次SARS发病特点,拟清热利湿、和胃化痰中药复方抗戾饮(蒿芩清胆汤合升降散化裁)治疗早中期SARS,临床疗效显著。 实验室SARS模型建立存在很多的安全隐患,我们目前实验室的安全状况不能满足对SARS模型的研究。鸡传染性支气管炎病毒(IBV)与SARS-CoV同属冠状病毒属,是动物冠状病毒属中唯一可以引起呼吸道感染的病毒,最近研究也发现SARS-CoV与IBV亲缘关系较近,核苷酸序列有63%的同源性。尽管IBV能造成鸡只的急性呼吸道传染性疾病,但是它对工作人员及环境在一定实验室条件下并无任何威胁,因此我们考虑选用IBV替代SARS-CoV作为我们模拟呼吸道冠状病毒感染模型的建立。 本项目正是基于以上背景而立题,试图建立安全的体内非SARS类呼吸道冠状病毒感染替代模型,从实验的角度客观评价中药复方制剂抗戾饮的作用环节,部分阐明其抗呼吸道冠状病毒感染的机制,为进一步推广应用提供科学依据。 一 抗戾饮体外抗呼吸道病毒实验研究 目的:探讨抗戾饮对体外培养的三种呼吸道病毒RSV(呼吸道合胞病毒)、Ad3(腺病毒)、FM1(甲型流感病毒)治疗效果。方法:首先分别进行中药抗戾饮对MRC-5细胞株及MDCK细胞株的毒性测定。再进行抗戾饮在MRC-5细胞中抗RSV、Ad3活性的测定以及在MDCK细胞中抗FM1活性的测定。结果:抗戾饮对MRC-5细胞及MDCK细胞的半数毒性浓度(TC50)分别为7.62mg/ml,21.33mg/ml,最大无毒浓度(TC0)分别为5.50mg/ml、9.38mg/ml。抗戾饮对三种体外培养的病毒(RSV、Ad3、FM1)的半数抑制浓度(IC50)分别为>7.62mg/ml、>7.62mg/ml、>22mg/ml。抗戾饮对三种体外培养的病毒(RSV、Ad3、FM1)的治疗指数(TI)均<1。结论:抗戾饮对体外培养的MRC-5及细胞株的毒性较大,且对体外培养的三株呼吸道病毒(RSV、