目的原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）是全球最常见、致死率最高的恶性肿瘤之一。HCC具有很高的血管侵袭及转移潜能,且缺乏早期诊疗的生物标志物,因此多数预后不良。HBV是HCC发生发展的一个重要危险因素之一。HBV的感染能导致慢性肝炎,并通过趋化因子诱导各类炎症细胞因子分泌、集聚及相互作用,导致肝细胞增殖与转化以及血管生成增多,最终导致HCC的发生发展。人趋化素样因子1（transcript variant 2 of chemokine like factor,CKLF1）是新发现的一种CC类趋化因子,已有很多研究表明其与一些自身免疫性疾病及炎症疾病具有相关性,然而关于HBV、CKLF1与HCC间相互关系的研究尚未见报道。本课题的目的是研究CKLF1在HBV相关HCC中的作用,探讨CKLF1在HCC发生发展中的机制及其在HCC耐药中的作用,为探寻HCC诊疗策略提供了有效的分子靶标。方法1.荧光定量PCR（qPCR）与western blotting对比Hep G2细胞系与Hep G2.2.15细胞系中CKLF1的表达差异;进一步用q PCR与western blotting研究HBV感染导致的CKLF1表达变化。2.生物信息学分析Oncomine网站内基因芯片,预测CKLF1与HCC发生发展及预后的相关性;利用qPCR,western blotting以及免疫组织化学（IHC）检测临床样本（HBV相关HCC）中CKLF1的表达情况并分析CKLF1的表达与HCC患者不同临床特点之间的相关性;检测不同细胞系中CKLF1的表达水平。3.实时细胞分析（Real-time Cellular Analysis,RTCA）、CCK-8、细胞划痕试验、Transwell小室细胞迁移及侵袭试验、平板克隆试验、裸鼠致瘤试验等检测CKLF1对细胞的增殖、迁移、侵袭、致瘤性等恶性转化的影响。4.生物信息学预测与CKLF1相关的炎癌转化信号通路IL-6/STAT3。q PCR,ELASA及western blotting检测CKLF1对IL-6,STAT3,705位点酪氨酸磷酸化STAT3（p-STAT3（Y705））及STAT3一系列下游靶基因的表达水平的影响,以及对乳酸生成和丙酮酸激酶活性的影响。此外,进一步利用IL-6 si RNA或p-STAT3（Y705）抑制剂Stattic处理外源性CKLF1过表达细胞,检测细胞的生物学特性变化及各基因表达水平、乳酸水平和丙酮酸激酶活性变化,探讨CKLF1致HCC发生发展的分子机制。5.多柔比星（DOX）处理不同CKLF1表达水平的肝癌细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期,q PCR与western blotting检测CKLF1与IL-6/STAT3信号通路中各基因表达水平,探讨了CKLF1对DOX诱导的细胞凋亡的影响及其分子机制。结果1.HepG2.2.15细胞系中CKLF1的表达水平显著高于Hep G2细胞系,且HBV的感染能上调CKLF1的表达。2.HCC癌组织中CKLF1表达水平较其对应癌旁组织明显高表达,且CKLF1的高表达与血管侵袭、肿瘤大小、肿瘤分级以及生存率等不良预后明显相关。HCC组织中CKLF1的表达水平与STAT3的表达水平呈正相关。3.CKLF1的过表达能通过IL-6/STAT3信号通路促进细胞的增殖、迁移、侵袭、糖酵解、致瘤性等恶性转化。4.CKLF1的过表达能通过IL-6/STAT3信号通路抑制DOX诱导的HCC细胞凋亡。结论HBV感染导致的CKLF1的上调可以通过炎癌转化重要信号通路IL-6/STAT3诱导HCC细胞恶性转化,最终导致HCC的发生发展与转移。此外,CKLF1还可以通过IL-6/STAT3信号通路抑制DOX诱导的细胞凋亡从而导致HCC产生耐药。因此,CKLF1是一个潜在的HCC预后因子与分子诊治靶标。