PTP1B对卵巢癌生长增殖调控分子机制的研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mmlovejj
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目的:在妇科恶性肿瘤中,卵巢癌的死亡率位居首位,其早期诊断困难,发病机制不清。蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)是胰岛素信号转导的重要负调控因子,与胰岛素抵抗相关。它也是一种信号传导酶,在多种类型肿瘤中发挥促进或抑制作用,依靠于相应的底物和所在的细胞环境。有研究表明其在卵巢癌中高表达,但由于方法局限,其相关研究甚少。本研究利用miRNA芯片微阵列技术探讨PTP1B及相关基因在卵巢癌中生长增殖调控中的分子机制,从而为卵巢癌早期诊断、判断预后及耐药方面提供理论依据。  方法:利用重组腺病毒载体介导基因转移技术,将野生型PTP1B基因导入SKOV3卵巢癌细胞,使其过剩表达PTP1B作为研究组(PTP1B组);将重组腺病毒载体介导空白质粒导入SKOV3细胞作为对照组(LACZ组)。采用miRNA微阵列技术筛选出两组中差异表达的miRNA及受PTP1B调控的相关基因,并用蛋白印迹杂交技术进一步证实。  结果:1、根据微阵列分析技术,在研究组与对照组的miRNA表达中,共筛查出29个差异表达的miRNAs,其中11个miRNAs呈高度表达,18个miRNAs呈低度表达。上调程度最高的三个miRNAs分别是miR-4649-3p,miR-4648,miR-4731-3p,下调程度最高的三个miRNAs分别是miR-3064-3p,miR-101,miR-675,差异有显著统计学意义(P<0.05)。miR-320a特异性最高,PTEN作为它的靶基因在卵巢癌中发挥重要作用。2、用Western blot进一步验证miR-320a调控PTEN蛋白的表达水平,结果显示,PTEN蛋白在研究组中表达量明显减少,显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。  结论:1、这些miRNAs与卵巢癌的发生发展有很大的相关性,在卵巢癌的增殖调控中起着重要的作用,特异性最高的是miR-320a,其可通过下调靶基因PTEN的表达而促进卵巢癌细胞的生长和增殖,可能为未来的肿瘤基因治疗提供潜在的可能。2、Western blot检测到PTEN蛋白在研究组中表达量明显减少,提示PTP1B可以通过下调抑癌基因PTEN的表达促进卵巢癌的发生发展,从而为PTP1B在卵巢癌中的潜在作用提供新的思路,PTP1B抑制剂有望成为治疗肿瘤的新药物。
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