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本试验在消除蛋鸡品种、日龄、营养水平等差异的情况下,观察含不同比例辣木叶粉的饲粮,对产蛋鸡生产性能、蛋品质、氧化还原状态、血液生化指标及健康状况的影响,探索辣木叶粉在蛋鸡饲粮中适宜剂量;进一步提取辣木叶粉中的黄酮,研究辣木叶粉粗提物对原代培养的蛋鸡肝脏细胞、体外抗氧化等影响。共包含3个试验,具体内容如下:试验一:强饲法测定辣木叶粉的代谢能本试验选择体重2.5±0.2 kg,选择采食正常、身体健康的400日龄海兰褐父母代种公鸡10只,处理分5个重复,每个重复2只鸡,按个体称重,将这10只鸡分成5组,使5组之间的鸡体重差异不显著。预饲含辣木叶粉的饲料7天,准确禁食48 h,期间鸡只自由饮水;强饲辣木叶粉50.0g/只,按个体记录强饲结束时间,按时收粪。测得辣木叶粉的表观代谢能为8.51 MJ/kg。试验二:辣木叶粉对产蛋鸡生产性能、血液生化和鸡蛋品质的影响选择采食正常、体重相近、健康开产的海兰灰蛋鸡360只(25周龄,整齐度90%以上),随机分为4个处理,每个处理6个重复,每个重复15只鸡。各处理的蛋鸡体重、产蛋率、平均蛋重等指标差异不显著。每3只鸡于单笼中饲养(40 cm×37 cm×40 cm),分别饲喂含辣木叶粉0、5%、10%和15%的蛋鸡配合饲料。试验共15天,其中预试期7天,正试期8周。试验结果表明,各处理组间料蛋比差异不显著(P>0.05),15%辣木叶粉组蛋鸡产蛋率显著低于其他各组(P<0.05),其他组间差异不显著(P>0.05);15%组蛋黄颜色相对于其他各组显著增加(P<0.05),5%和10%组蛋黄颜色显著高于对照组(P<0.05),蛋壳强度、蛋壳厚度和蛋形指数在各组间差异不显著(P>0.05),10%组显著提高16周鸡蛋蛋白高度和哈氏单位(P<0.05);试验期第8周末,10%和15%组血浆中超氧化物歧化酶(SOD)浓度均高于对照组(P<0.05),血浆丙二醛(MDA)浓度显著低于对照组(P<0.05);三处理组血浆GSH浓度均显著高于对照组(P<0.05),血浆T-AOC在各组间无显著差异(P>0.05);添加辣木叶粉对8周末蛋鸡血浆谷丙转氨酶水平无显著影响(P>0.05);15%辣木叶粉添加组显著升高血液谷草转氨酶(AST)浓度(P<0.05),5%、10%组AST浓度与对照组相比无显著变化(P>0.05);与对照组相比,5%组总蛋白浓度显著增加(P<0.05),15%组球蛋白和尿酸浓度显著降低(P<0.05)。5%或10%的辣木叶,蛋鸡肝、肾组织无显著变化,15%组可见肝组织中有大量脂滴,肾组织炎症明显。综上,5%或10%组对蛋鸡健康无不良影响;15%组对蛋鸡健康产生不利影响。试验三:辣木叶粉粗提物体外抗氧化评价及其对原代培养的蛋鸡肝脏细胞的影响试验1,采用超声提取法获得辣木叶粗提物,测定其抗氧化活性。结果表明,以VE为阳性对照,70%、80%乙醇辣木提取物对DPPH自由基的清除率随提取液质量浓度的增加而增加,其中70%乙醇辣木提取物对DPPH自由基的清除率略低于80%乙醇辣木提取物和VE;以VE为阳性对照,70%、80%乙醇辣木提取物总还原力随提取液质量浓度的增加而增加,两组总还原力相当,但低于VE。试验2,通过体外分离培养蛋鸡肝脏细胞,利用过氧化氢诱导氧化应激,测定培养液中的LDH、MDA含量,测定细胞内的SOD和总抗氧化能力(T-AOC)水平,研究辣木叶粉粗提物的抗氧化作用。预实验表明,随着辣木叶提取物浓度的增加,细胞的成活率下降,因此采用0、200、400、600和800μg/ml做为评价辣木叶提取物对肝细胞氧化状态影响的处理浓度。结果表明,与对照组相比,辣木叶粉提取物组SOD无显著差异(P>0.05),但与H2O2处理组相比,辣木叶粉提取物组SOD显著增加(P<0.05);600和800μg/ml辣木叶粉提取物组T-AOC显著降低(P<0.05),所有辣木叶粉提取物处理组T-AOC均显著高于H2O2处理组(P<0.05);辣木叶粉提取物组的LDH显著低于单独H2O2处理组(P<0.05),与对照组差异不显著(P>0.05);辣木叶粉提取物组MDA虽显著高于正常对照组(P<0.05),但与单独H2O2处理组相比,MDA显著降低(P<0.05)。综上,辣木叶粉提取物能有效缓解细胞的氧化损伤,发挥保护细胞的作用。