太白贝母组织培养和繁殖研究

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太白贝母(Fritillaria taipaiensis P.Y.Li)是秦巴山脉太白山地区的道地名贵药材,入药历史悠久,具有润肺,化痰,止咳的功效。太白贝母有性繁殖需4-5年时间才能完成,且种子发芽率低、出苗困难;采用无性繁殖方法,用种量大,繁殖系数低,需求量大,市场一直供不应求,造成生产成本昂贵。现代组织培养技术为大量快速繁殖植物种苗提供了可能,同时,太白贝母一朵花可结实种200-250粒种子,如果能使种子发芽也是一种重要选择途径。本试验利用组织培养技术、种子催芽技术和光照对贝母生长发育的影响三个方面做了研究,为大规模人工种苗繁育和高产栽培技术提供基本技术依据。研究结果如下:1.太白贝母组织培养繁殖方法以太白贝母鳞茎为外植体,最佳消毒方式是用75%乙醇浸泡30s,随后用10%次氯酸钠浸泡20min,再用0.1%升汞消毒5min,无菌水冲洗5次消毒效果最好。愈伤组织诱导的培养最佳配方为MS+NAA 1.0mg/L+6-BA3.0 mg/L,此培养基愈伤组织诱导率最高,且生长速度较快;再生小鳞茎诱导的最佳培养基为MS+NAA 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L,此培养基鳞茎诱导率最高;愈伤组织诱导分化成不定芽的培养基为MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 0.5mg/L,此培养基不定芽的诱导率最高,且不定芽生长最为旺盛。2.太白贝母种子沙藏方法太白贝母种子最佳的沙藏方法是:沙藏前用激素GA3(50 mg/L)浸泡种子24h后再沙藏;沙藏时按采用种子与锯末、腐殖土、沙子混合方法,其比例为种子:锯末:腐殖土:沙子=1:1:1:2,贮藏于室内透气的木箱内,用湿布覆盖,并保持湿度在60%~70%,放置于冷凉处,并定期搅拌;沙藏层积过程中,层积90天的种胚已经达到胚乳的3/4,种子的过氧化氢酶和过氧化物酶的活性急剧升高,层积90d的种胚形态学后熟基本完成;随着天气变冷,两种酶的活性稍微降低,随后天气转暖两种酶的活性又急剧升高,完成种胚的生理学后熟,层级210d后种胚后熟完成,长满整个胚乳,达到可发芽状态。此方法的出苗率最高。3.太白贝母的育苗方法采用经沙藏和激素处理的种子,选择土壤湿润,覆土1cm,出苗效果最好。4.光照对太白贝母生长发育的影响遮荫率为60%时,遮荫对“飘带叶”期植株的生长影响最大,可促进其生长,“树儿子”期植株次之,“灯笼花”期植株最弱。遮荫条件下,“飘带叶”植株贝母辛含量增速最快,含量较高,“树儿子”期植株贝母辛含量相差不大,“灯笼花”期植株贝母辛含量均降低。因此,建议只对“飘带叶”期植株进行遮荫。
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