【摘 要】
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为了筛选到p185受体的小分子抑制剂,该文克隆了p185受体的胞外区结构域基因,并在大肠杆菌高效表达了p185受体的胞外区结构域,表达蛋白以包涵体形式存在,包涵体经洗涤、亲和层
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为了筛选到p185受体的小分子抑制剂,该文克隆了p185受体的胞外区结构域基因,并在大肠杆菌高效表达了p185受体的胞外区结构域,表达蛋白以包涵体形式存在,包涵体经洗涤、亲和层析获得纯化蛋白.以p185受体的胞外区结构域为靶点筛选随机环七肽库,经三轮筛选,富集程度达到28,序列分析表明,所筛到的序列具有较好的多样性和同源性,并且具有T(S)LP的一致序列,对噬菌体克隆的细胞抑制活性实验证明所筛选到的小肽对乳腺癌细胞MCF-7有抑制作用.为了从分子水平上理解所筛选的小肽对p185受体的抑制机理,该文模建了p185的胞外区结构域与小肽的三维结构,通过分子对接表明小肽中Thr(Ser)与p185胞外区结构域中279号氨基酸Ser形成氢键,而小肽中Leu起维持稳定构象作用,小肽中Pro起位阻作用以封闭受体,从而达到抑制受体的活性.该研究为肿瘤的生物治疗奠定了基础.
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