论文部分内容阅读
目的:通过建立肝硬化大鼠模型和肝脏缺血再灌注模型,探讨瑞芬太尼预处理对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注损伤尤其是对肝细胞凋亡的影响。方法:选择健康SD(Sprague-Dawley)雄性大鼠61只,用40%CCl4溶液进行灌胃造模,灌胃8周,正常饮食,以10%乙醇浓度作为饮用水,灌胃6周后恢复正常饮水。以下操作结束后通过HE染色判断肝硬化程度。将建模成功的42只大鼠随机分为6组:假手术组(S组,n=7)、缺血再灌注组(IR组,n=7)、生理盐水组(NS组,n=7),瑞芬太尼预处理组(RPC组,n=21)。而瑞芬太尼预处理组按不同的给药浓度分为R1组(0.4μg/kg/min,n=7),R2组(2μg/kg/min,n=7)和R3组(10μg/kg/min,n=7)。R1组、R2和R3组分别输注不同浓度的瑞芬太尼15min,而NS组输注与RPC组等容量的生理盐水15min,输液停止10min后进行与IR组相同的操作:结扎肝动脉、门静脉和胆管的分支30min,再灌注90min;但S组只穿线不结扎。而后取材。采血用以检测血清ALT、AST水平。取中叶肝组织,WST法检测SOD水平,TBA法检测MDA水平,Western Blot测定Cleaved-Caspase-3的蛋白含量。取肝左叶组织固定、包埋后,HE染色观察肝脏形态学改变,免疫组化测定Caspase-3的活化程度,TUNEL法检测肝细胞凋亡情况。结果:与S组比较,其余五组汇管区和肝窦炎症细胞浸润和红细胞滞留明显加重;血清转氨酶水平、MDA水平均显著升高(P<0.01),肝组织SOD活性、Caspase-3活性和凋亡指数都显著下降(P<0.01)。与IR组比较,R2、R3组炎症细胞浸润和红细胞滞留均明显降低;R2组、R3组ALT、AST水平明显下降(P<0.01),SOD水平显著升高而MDA水平则明显下降(P<0.01),Caspase-3的活化程度下降(P<0.01)且肝细胞的凋亡减少(P<0.01);而R1组的变化不明显(P>0.05)。结论:瑞芬太尼预处理可以通过降低肝细胞氧化应激反应和肝细胞凋亡程度,从而减轻肝硬化大鼠肝脏的缺血再灌注损伤。其中2μg/kg/min、10μg/kg/min的瑞芬太尼预处理均有这种保护作用,但是0.4μg/kg/min瑞芬太尼的保护作用则不明显。