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第一部分 卵透明带精子受体受精后失活的分子机制初探 受精是生殖过程中的一个核心环节,研究受精机理,调节受精是生育调控中的一个重要途径。受精的调节主要集中在精子和卵透明带的相互识别和结合上。 透明带(ZP)是覆盖在卵细胞表面的一层糖蛋白外衣,它不仅保护卵细胞和早期胚胎,还是精卵识别和结合的主要成分,受精后卵透明带发生变化阻止多精子受精。由于透明带成分具有种族特异性和组织特异性,可用于发展避孕疫苗,阻止受精,达到孕前控制生育的目的。 透明带由 ZP1,ZP2,ZP3三种硫酸糖蛋白组成,其中ZP3是精卵结合的初级受体。ZP3的多糖侧链具有受体的活性,小鼠ZP3的精子受体活性在于糖蛋白上特异的0-连寡糖,但具体是什么糖链充当精子受体?受精后发生带反应阻断多精子受精,小鼠的0-糖链在带反应中有什么变化?作为受精前提条件的激活过程是否能引起透明带的这些变化?目前尚无明确的答案。本研究主要探讨受精和激活对作为精子受体的透明带0-糖链的影响。第一章 乙醇人工激活小鼠卵的最佳卵龄探讨实验目的 比较小鼠卵龄对体外受精和乙醇人工激活的影响,探讨乙醇激活卵母细胞的最佳卵龄。实验方祛 用PMSG和HCG对小鼠进行超数排卵,取不同卵龄的卵母细胞进行体外受精和乙醇人工激活,比较不同卵龄卵的体外受精率和人工激活率。以卵子受精后次日分裂成2-细胞作为卵细胞被激活受精的标志,以出现原核或发生速即卵裂作为被激活的标志。 实验结果 利用不同卵龄的小鼠卵母细胞进行体外受精和乙醇人工激活,比较受精 率和激活率。结果显示,小鼠卵母细胞较容易被乙醇激活,从 13h到 20h的 卵母细胞,随着卵龄的增加,激活率升高,20h 卵龄的卵母细胞的激活率达 sl.6人 但卵龄超过 20h,激活率转而下降。 卵母细胞被箱子激活受精的时间更有限,卵龄为 13—15h的卵子较容易 发生体外受精,17h后的卵母细胞的体外受箱率很低。 结论 刚排出不久(注射hCG后13l 一的卵母细胞较适合体外受精,卵龄稍大 (注射hCG后20hr前后)的卵毋细胞被乙醇处理的激活率高。提示箱子对卵 子的天然激活和乙醇对卵子的人工激活有不同的作用环节和机理。