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目的:研究在肝癌中RMP(RPB5 Mediating Protein)介导的DNA损伤修复及其分子机制。方法:1、肝癌细胞以及肝正常细胞经60Coγ射线处理后,Real-time PCR和Western blot检测RMP的mRNA和蛋白表达水平。2、通过Real-time PCR检测各细胞株辐照后不同时间点Rad50、Mre11和Ku70的mRNA表达水平。3、通过Western blot检测各细胞株辐照后不同时间点Rad50、Mre11、Ku70、ATM、p-ATM、p65、p-p65、AKT、p-AKT、IκB的蛋白表达水平。4、通过免疫共沉淀实验检测RMP与Mre11的相互作用。5、通过Western blot检测瞬时转染不同剂量RMP过表达质粒pCDNA3.1-RMPo的HepG2细胞中p65、p-p65、IκB的蛋白表达水平。6、通过Western blot检测ATM抑制剂Ku55933处理后各细胞株p65入核情况。7、通过Western blot检测NFκB磷酸化抑制剂Bay 11-7082处理后各细胞株中p65和p-p65的蛋白表达水平。8、通过彗星电泳实验检测NFκB磷酸化抑制剂Bay 11-7082处理后各细胞株的DNA损伤修复情况。结果:1、肝癌细胞产生DNA损伤之后,RMP的mRNA和蛋白表达水平升高,而在肝正常细胞内,RMP的mRNA和蛋白表达水平没有明显变化。2、RMP过表达和干扰并不影响肝癌细胞中Rad50、Mre11和Ku70的m RNA表达。3、RMP过表达和干扰并不影响肝癌细胞中Rad50、Mre11、Ku70、ATM和p65的蛋白表达水平。4、RMP过表达能提高肝癌细胞中ATM和p65的磷酸化水平,干扰RMP则降低ATM和p65的磷酸化水平。5、Western blot检测瞬时转染不同剂量RMP过表达质粒pCDNA3.1-RMPo的细胞株中p65、p-p65和IκB的蛋白表达水平,发现RMP的表达量与p65的磷酸化水平两者之间存在剂量效应。6、RMP与DNA损伤修复因子Mre11存在相互作用。7、ATM抑制剂Ku55933处理后,各细胞株核内p65的表达量降低。8、NFκB磷酸化抑制剂Bay 11-7082处理后,各细胞株中p65磷酸化水平降低。9、NFκB磷酸化抑制剂Bay 11-7082处理后,细胞的DNA损伤修复作用被抑制。结论:RMP可以通过ATM/NFκB途径来促进肝癌细胞的DNA损伤修复能力。