第一部分 CXCR4/CXCL12在宫颈癌细胞的表达及与淋巴结转移及宫颈慢性炎症相关性。 目的：淋巴结转移与否是影响宫颈癌预后的重要因素之一，本研究旨在探讨CXCR4、CXCL12蛋白在宫颈癌细胞过表达相关性、与宫颈癌淋巴结转移及宫颈间质慢性炎症浸润的相关性。 方法：应用免疫组织化学法检测35例宫颈腺癌、89例宫颈鳞癌组织标本癌细胞及20例正常宫颈组织中CXCR4、CXCL12蛋白的表达，所有病例根据淋巴结有无转移分组。淋巴结阳性组28例，淋巴结阴性组96例。90﹪以上肿瘤细胞强着色定义为过表达。采用Fisher’s精确概率检验法、卡方检验、秩和检验及PearSon相关检验分析结果。 结果： ①宫颈癌细胞CXCR4表达与淋巴结转移89例宫颈鳞癌中均有不同数量肿瘤细胞表达不同强度的CxCR4，阳性表达率100﹪(89/89)，过表达率44.94﹪(40/89)。胞膜、胞浆着色，未见胞核着色。 ②宫颈癌细胞CXCL12表达与淋巴结转移及分期CXCL12在宫颈鳞癌细胞胞膜和胞浆表达，阳性表达率100﹪(89/89)，过表达率23.60﹪(21/89)。淋巴结转移组CXCL12过表达率(20.00﹪，4/20)低于淋巴结无转移组(24.64﹪，17/69)，p=0.460。 ③宫颈癌细胞CXCR4/CxCL12表达的相关性在宫颈鳞癌，临床ⅠB期且无淋巴结转移组，CXCR4表达得分与CXCL12表达得分间呈正相关(P=0.029)。所有病例合并后分析，CXCR4与CXCL12表达具相关性(P=0.002)。 结论: 1. 宫颈腺癌细胞过表达CXCR4与盆腔淋巴结转移相关，与宫颈鳞癌盆腔淋巴结转移不相关。 2. 宫颈癌细胞过表达CXCL12与宫颈腺癌、鳞癌淋巴结转移均无关却随宫颈腺癌临床分期升高而升高。 3. CXCR4-CXCL12在宫颈鳞癌及早期腺癌中的表达呈正相关。 4． CXCL12在宫颈原发灶的表达与鳞癌宫颈间质炎性浸润不相关，却与腺癌宫颈间质淋巴细胞浸润相关。 第二部分宫颈癌细胞CxCL12、CXCR4表达与宫颈癌细胞增殖及血清SCC水平相关性研究。 目的：探讨CXCL12/CXCR4与宫颈癌细胞增殖及宫颈癌病人血清SCC水平相关性。 方法：应用免疫组织化学法检测70例宫颈癌组织标本中癌细胞CXCR4、CXCLl2蛋白及Ki-67抗原的表达。应用放射免疫法检测病人血清SCC水平。 结果： ① CXCR4、CXCL12、Ki-67在宫颈癌组织中的表达及宫颈癌病人血清SCC水平70例病例中均有不同数量肿瘤细胞表达不同强度的CXCR4、CXCL12，阳性表达率分别为97.14﹪(68/70)、98.57﹪(69/70)。均为胞膜、胞浆着色，未见胞核着色。 Ki-67指数在70例宫颈癌组织中高低不一，26.41±24.945(mean±SD)(范围：2～95)，胞核染色。 血清SCC水平在70例病例高低不一，1.354±2.95643(mean+SD)(范围：0.00ng/ml～23.60ng/ml)，阳性率为87.14﹪(61/70)。 ②宫颈癌细胞CXCR4、CXCL12表达与Ki-67指数及血清SCC水平相关性Ki-67指数与宫颈癌细胞CXCL12表达呈正相关，却与CXCR4表达无相关性。宫颈癌细胞CXCL12、CXCR4表达与病人血清SCC水平均无相关性。 结论: 1.宫颈癌细胞自分泌CXCL12可促进宫颈癌细胞增殖。 2.宫颈癌细胞表达CXCR4与宫颈癌细胞增殖程度不相关。 第三部分 CXCR4/CXCL12相互作用对宫颈癌细胞株运动、粘附、侵袭能力的影响。 目的：检测CXCR4、CXCL12蛋白在宫颈腺癌、鳞癌细胞株的表达。观察CXCR4-CXCL12互相作用对体外培养的宫颈腺癌、鳞癌细胞运动、粘附、侵袭能力的影响。初步探讨CXCR4-CXCL12相互作用在宫颈癌转移发生中的作用及CXCR4抑制剂抑制宫颈癌细胞转移的可能性，为CXCR4抑制剂用于临床提供实验基础。 方法：①细胞免疫化学法、Western blot法及流式细胞仪检测CXCR4/CXCL12在宫颈癌细胞HeLa、SiHa细胞的表达情况。 ②侵袭性实验、划痕实验、粘附性实验分别检测CXCR4/CXCL12相互作用对HeLa、SiHa细胞侵袭能力、运动能力、粘附能力的影响。 ③侵袭抑制性实验检测CXCR4抑制剂对HeLa、SiHa侵袭能力的影响。 结果： ①HeLa，SiHa细胞均表达内源性CXCR4、CXCL12。但两者在HeLa细胞的表达均强于SiHa细胞。 ② CXCL12呈剂量依赖性诱导HeLa、SiHa细胞穿过仿人基底膜。100ng/ml～200ng/ml浓度时诱导效果最佳。 ③在相同浓度CXCL12(200ng/ml)诱导下，HeLa、SiHa细胞经CXCR4生物抑制剂MAB170(20ug/ml)处理后，与对照组(MAB170=0ul/ml)相比，穿透仿人基底膜细胞数明显减少(p=0.000)。 ④HeLa、SiHa细胞经CXCL12(200ng/ml)处理后，HeLa细胞一周内爬满六孔板，SiHa细胞四天爬满六孔板。对照组(0ng/ml)所用时间均长于处理组。MAB170(20ug/ml)与CXCL12(200ng/ml)共同作用于细胞后，与前两组相比，细胞爬行速度明显减慢。 ⑤HeLa细胞无处理组与CXCL12(200ng/ml)处理组之间(p=0.038)；CXCL12(200ng/ml)处理组与CXCL12(200ng/ml)与MAB170(20ug/ml)共同处理组之间(p=0.015)，HeLa细胞粘附能力差异均具统计学意义；但无处理组与CXCL12及MAB170共同处理组间HeLa细胞粘附能力差异无统计学意义(p=0.144)。SiHa细胞株无处理组与CXCLl2(200ng/ml)处理组之间(p=0.007)，无处理组与CXCL12(200ng/ml)及MAB170(20ug/ml)共同处理组间(p=0.024)，SiHa细胞株粘附能力差异具统计学意义；但CXCL12处理组与CXCL12与MAB170共同处理组之间(p=0.078)，SiHa细胞粘附能力差异无统计学意义。 结论： 1.宫颈腺癌、鳞癌细胞株均表达内源性CXCR4及CXCL12。但两者在HeLa细胞株的表达均强于SiHa细胞株。 2.CXCL12可增强HeLa、SiHa细胞移动、侵袭、粘附能力。 3.CXCR4抑制剂可有效抑制CXCL12增强的HeLa、SiHa细胞移动、侵袭能力，HeLa细胞粘附能力。