本文结合非培养方法和富集培养方法研究了胜利油田单12区块和罗801区块油藏样品和注入水样品的微生物群落结构及其动念变化，同时进行了产表面活性剂菌株的筛选工作。　　 基于16S rRNA基因的DGGE分析结果展示了S12区块油藏微生物的多样性和不同油井样品微生物群落结构的差异以及S12-4和S12-5油井进行激活处理之后微生物群落结构的变化。运用T-RFLP技术分析了2个区块六个样品的油藏微生物多样性，基于T-RFLP图谱的多样性指数表明注入水样品(常温)、单12区块样品(66℃)和罗801区块样品(80℃)的油藏微生物多样性随着温度的升高而降低。查询RDP数据库和参考16S rRNA基因文库分析结果，推测注入水和油藏中优势微生物为Pseudomonadales，Alteromaonadales，Oceanospirillales目微生物和产甲烷古菌，此外有许多的T-RFs包括一些优势T-RFs没有找到对应的数据。　　 结合16S rRNA基因克隆文库和T-RFLP技术对S12-4油井油藏微生物群落在激活处理前后的动态变化进行了研究，结果表明油藏细菌群落在激活剂注入后多样性降低，以Thalassolituus属为主的Oceanospirillales目微生物含量锐减，随着时间的推移，微生物群落的多样性开始增加，先后出现了α-proteobacteria纲和Flavobacteriales目微生物。在整个过程中，以Pseudomonas属为主的Pseudomonadales目微生物和以Marinobacter属为主的Alteromaonadales目微生物一直保持着群落中优势菌的地位。古菌群落在激活处理的过程中多样性总体呈现了下降的趋势，但是产甲烷菌一直是群落中的优势菌。　　 使用三种培养基对单12区块油减样品进行富集培养，然后提取了富集样品的总DNA并构建了16S rRNA基因克隆文库，分析结果表明异养菌富集样品，烃降解菌富集样品和硫酸盐还原菌富集样品中的优势菌为Thermotoga属，Thermaerobacter属和Thermoanaerobacteriales目微生物。系统发育分析结果表明，非培养样品和富集样品的微生物群落结构存在很大的差异。　　 通过选择性培养获得了7株菌，系统发育分析表明这些菌株与已知可培养Geobacillus属微生物和菌株Bacillus eolicus4-1有很高的同源性，结合它们发酵液的pH值和表面张力值的测定结果，以及Geobacillus属和菌株Bacillus eolicus4.1的研究结果，证明这7株菌都有产表面活性剂以及应用于驱油的潜力。　　 本文工作结合培养和非培养方法获得了胜利油田2个区块油藏微生物多样性的信息，并重点研究了S12-4油井油减微生物群落在激活剂作用下的动态变化情况，同时从油藏样品中筛选到了一些产表面活性剂菌株。这些工作拓展了人们对油藏微生物多样性及其研究方法的认识，同时为微生物采油的应用提供了重要的信息。