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生物制氢法弥补了传统制氢法的诸多缺点而得到重视,厌氧发酵制氢是生物制氢的一种方法,具有产氢效率高、产氢效果稳定且价格低廉等优点。从本实验室CSTR中分离到一株产氢菌,命名为Pectinatus sp.L6。本实验考察了在间歇产氢装置中培养温度对产氢菌L6发酵产氢的影响,并研究了在五种不同培养温度下pH值、干重、液相末端产物的变化规律,同时研究了产氢菌L6脱氢酶活性即DHA的测定条件以及培养温度对DHA的影响。产氢菌L6产氢能力的研究结果表明:产氢菌L6在五个不同培养温度下生长及产氢能力最好的是35℃,其它培养温度下产氢菌L6生长及产氢能力由大到小的顺序依次为30℃、40℃、25℃、45℃。在35℃的培养温度下,产氢菌L6的产气速率在培养33h时有最大值84.7mL/h,产氢菌L6的产氢速率在培养7h时迅速增加并在培养17h时基本稳定,产氢速率在培养34h时有最大值72.1mL/(L·h),在培养64h时产氢菌L6几乎不产氢;在培养40h时,产氢菌L6单位时间干重的增加量有最大值579mg/L;产氢菌L6的初始pH值为6.13,培养12h时pH值急剧下降至4.37,培养64h时基本稳定在4.45;产氢菌L6液相末端发酵产物的百分含量由大到小的顺序依次为丁酸、乙酸、丙酸、乙醇,培养28h时丁酸的百分含量达最大值86.1%,此时乙酸、丙酸和乙醇的百分含量依次为8.3%、3.9%和1.3%,产氢菌L6的发酵类型为丁酸型发酵。其它四个培养温度下各指标虽然没有培养35℃时的效果好,但是基本规律与培养35℃时保持一致,在培养温度分别为3℃、40℃、25℃和45℃时,产氢菌L6的最大产氢速率分别为59.0mL/(L·h)、51.0mL/(L·h)、31.8mL/(L·h)、23.9mL/(L·h)。通过对DHA的四种测定方法优缺点的对比,最终选择TTC-DHA法测定产氢菌L6的DHA。研究结果表明,TTC-DHA法中产氢菌L6的DHA最佳测定条件为:菌液的离心转速为6000rpm,离心时间为10min,最佳吸收波长为480nm,水浴温度35℃,显色反应时间4h,TF萃取时间为1Omin,萃取剂丙酮的最佳加入量为5mL,TTC-DHA法标准曲线的还原时间为10min,Tris-HC1(pH=8.4)、TTC 标液、Na2SO3(0.36%)溶液和 Na2S204 的最佳加入量依次为2mL、2mL、1mL和5mg。产氢菌L6在五个不同培养温度下DHA由大到小的顺序依次是:35°C、30°C、40°C、25°C、45°C,说明产氢菌L6的产氢能力及生长状况越好,其DHA也越高。培养35°C时产氢菌L6的DHA最高,DHA增加、稳定在最佳范围内及有所下降的三个时期分别为:Oh至24h,28h至48h,52h至64h。初始TF值为27mg/L,在培养32h时有最大值133mg/L,在培养64h时下降至94mg/L。